探索大鼠AA对金铁锁总皂苷抗炎作用反应性范文

【摘要】目的通过实验观察和探讨金铁锁总皂苷（TSPT）抗炎作用及其作用机理。方法建立佐剂性关节炎（AA）动物模型，通过观察TSPT对AA大鼠足肿胀及炎性组织液中丙二醛（MDA）水平的影响来探讨其抗炎作用及其作用机制。结果TSPT能有效抑制AA大鼠足肿胀，降低炎性组织液中MDA的水平。结论TSPT具有良好的抗炎作用，其作用机制与降低MDA水平有关。

【关键词】金铁锁总皂苷佐剂性关节炎MDA

【Abstract】ObjectiveToobservetheanti-inflammationeffectsandpossiblemechanismofTotalSaponinsofPsammosilenetunicoids(TSPT).MethodsAfterestablishingAAratsmodel，theTSPT’santi-inflammatoryeffectsandmechanismagainstAAwasstudiedthroughobservingchangesoftheankleswellingandcontentsofMDAininflammatory-tissuesoakofAArats.ResultsTSPTcouldinhibitarticularswellingandeffectivelydecreasethecontentofMDAininflammatorytissuesoakofAArats.ConclusionTSPThasgoodanti-inflammationeffectsandthemechanismislikelyrelatedtoTSPT’sdown-regulationofMDA.

【Keywords】TSPTAAMDA

金铁锁（苗语：Jenbtieegsox）系苗族习用药材［1］，首载于《滇南本草》，为石竹科植物金铁锁Psammosilenetunicoides.W.C.WuetC.Y.Wu的干燥根。别名：独定子、对叶

七、白马分鬃等，主要含皂苷类成分。具有散瘀定痛、止血、消痈排脓之功，用于跌打损伤，风湿痛、胃痛、创伤出血等的治疗［2］。目前尚关于其抗AA研究的文献报道，本文就关于金铁锁总皂苷抗AA作用的研究作一介绍。

1材料与方法

1.1材料Freund’s完全佐剂（sigma公司产品，由帮定生物技术公司提供），注射器（1.0ml），金铁锁总皂苷（贵阳中医学院制剂教研室提取），地塞米松注射液（批号：0206101，天津金辉氨基酸有限公司提供），风湿宁注射液（批号504002，罗浮山药业提供），TSPT（贵阳中医学院制剂教研室提取）。

动物：70只雄性Wistar大鼠，体重：(200±30)g，清洁级二级动物（由军事医学科学院动物中心提供）。

1.2实验方法

1.2.1分组70只Wistar雄性大鼠，随机分为7个组。分别为：生理盐水组（NS）、模型组（A）、西药阳性对照组（地塞米松注射液）（B）、中药阳性对照组（风湿宁注射液）（C）、TSPT大（D）、中（E）、小（F）剂量组。

1.2.2造模除NS组外，其余各组于每只大鼠右后足跖皮内注射Freund’s完全佐剂0.1ml致炎。第1天记录大鼠的体重和两侧脚踝关节的周长。

1.2.3给药除NS组外，其余均按上述方法造模，于造模后第9天开始给药，连续给药12天。每隔3天，记录各组大鼠体重，及踝关节肿胀，末次给药（造模后第21天）1h后处死大鼠，观察药物对继发性病变的影响。

2结果

2.1TSPT对AA大鼠足肿胀的影响足肿胀的测量方法：用记号笔标记肿胀踝关节周径，每日以特制软皮尺测量踝关节周长（软皮尺无弹性，最小刻度为0.1cm）。实验结果见表1。

统计结果分析：实验结果表明，与生理盐水比较，造模后第8天（药前）各组足均明显肿胀（P＜0.01），表明造模成功。用药约1周后，TSPT大、中剂量对足肿胀均显示出明显的抑制作用（P＜0.01），作用强度大于中药阳性组（风湿宁注射液），接近地塞米松组。提示：TSPT能有效抑制AA大鼠踝关节的炎症反应。

2.2大鼠致炎足中丙二醛（MDA）生成量的测定动物造模分组给药同上。鼠致炎21天后处死，在致炎侧关节上方0.5cm处摘取肿胀足爪，纵向切开，放入5ml生理盐水的试管中4℃浸泡过夜，离心（3000r/min）取上清液，-20℃保存待测。

试剂与仪器：MDA试剂盒（由北京帮定生物技术公司提供），可见分光光度计（岛津：FW/UV265）（由北京武警总医院制剂科提供）、恒温水浴锅、离心机（由北京武警总医院检验科提供）。

测定方法及参数：硫代巴比妥酸结合法，于532nm处测定，实验操作方法严格按照试剂盒说明进行。

2.3统计学方法实验结果以（x±s）表示，采用t检验。如表2。

表1TSPT对AA大鼠足肿胀的影响（n=10，x±s）

注：与NS组比较：***P＜0.01;与模型组（A组）比较：★★P＜0.05，★★★P＜0.01；与西阳组比较

（B）：△△P＜0.05，△△△P＜0.01。与中阳（C）组比较：※※P＜0.05，※※※P＜0.01

表2TSPT对AA大鼠炎性组织液中MDA的影响(n=6，x±s)

注：与NS组比较：**P＜0.05;***P＜0.01;与模型组（A）比较：★★P＜0.05，★★★P＜0.01;与西阳组比较（B）：△△P＜0.05，△△△P＜0.01;与中阳组比较：※※P＜0.05

图1TSPT对MDA水平的影响图

由图表统计分析可知：与NS组比较，模型组炎性组织液中，MDA的含量显著升高（P＜0.01），这显示出AA大鼠出现严重的炎性反应。经治疗后，与模型组比较，各个给药组AA大鼠炎性组织液中MDA含量均有不同程度的降低，B（西阳组）、D（TSPT大剂量组）表现出差异有非常显著性（P＜0.01）。

3讨论

MDA通过酶系统和非酶系统产生氧自由基，自由基可引起脂质过氧化，影响一些基因的表达，在炎症和免疫过程中起着中介作用［3］。因此自由基在生物体系中的作用正受到广泛重视。在正常情况下，机体内仅产生少量氧自由基，其产生、利用和清除保持一种动态平衡。一旦由于某种原因造成体内自由基的堆积，便会损伤组织细胞，导致各种病理变化。

AA大鼠炎症反应中，模型对照组炎性组织液中MDA含量显著升高与AA大鼠足肿胀呈正相关，表明致炎因子使机体产生过量的氧自由基。这些活性氧可直接作用于一些细胞包括免疫细胞，与其脂质、蛋白质、核酸等发生反应，引起脂质过氧化，使MDA增多，造成细胞毒性和功能受损。MDA的增多会造成自由基连锁反应加强，使炎症加重或发展。经TSPT治疗后，大鼠炎性组织中MDA的含量降低，表明TSPT能抑制或阻断炎症时氧自由基的过量产生与释放，减轻氧化应激反应与脂质过氧化，使其终产物MDA降低，并接近正常组水平，因而减少了对细胞的损伤，纠正体内氧自由基代谢失衡或紊乱的作用，调整机体内环境，起到消炎、抗氧化和细胞保护作用，促进了炎症反应的消退。TSPT抗炎免疫的作用机理是多方面的，本实验结果提示，TSPT对AA大鼠炎症时氧自由基代谢的调整作用，可能是其中一个重要环节，对AA大鼠的抗关节炎作用可能与其降低脂质过氧化，恢复抗氧化酶活性和腹腔Mφ分泌功能等有关。

【参考文献】

1包骏，冉懋雄.贵州苗族医药研究与开发.贵阳：贵州科技出版社，1999，174.

2中华本草编委会.中华本草.第二卷.上海:上海科学技术出版社，1999，782.

3莫简.关于自由基在生物体系中作用的几点看法.第四军医大学学报，1997，18(2):199.新晨