血液的化学元素范文
血液的化学元素范文第1篇
【摘要】 目的 研究异黄酮苷元滴丸和片剂的药动学及相对生物利用度。方法 以sd大鼠为实验动物，采用高效液相色谱法测定异黄酮苷元滴丸和片剂单剂量灌胃给药后大鼠的血药浓度变化。用3p97软件进行药代动力学数据处理， 计算 分析药代动力学参数和相对生物利用度。结果 异黄酮苷元滴丸：auc为46.30 μg·min·ml-1，cmax为0.89 μg·ml-1，tmax为18.03 min;片剂：auc为36.01 μg·min·ml-1，cmax为0.41 μg·ml-1，tmax为31.43 min，滴丸相对于片剂的相对生物利用度为128%。结论 异黄酮苷元滴丸、片剂均符合一室模型，滴丸较片剂具有较高的生物利用度。本研究为异黄酮苷元滴丸研制提供了一定的依据。
【关键词】 异黄酮苷元滴丸;异黄酮苷元片剂;高效液相色谱法;药代动力学;相对生物利用度
abstract:objective to investigate the pharmacokinetic and relative bioavailability of isoflavone aglycone dripping pills and tablets in healthy sd rats,and evaluate the pharmacokinetic effects of the two dosage forms of isoflavone aglycone. methods 36 sd rats were intragastrically administered with the suspension solution of isoflavone aglycone dripping pills and tablets at single dose,and changes in plasma concentration were determined by hplc. pharmacokinetic data were processed with 3p97 software and the pharmacokinetic parameters and relative bioavailability were calculated. results for dripping pills of isoflavone aglycone:auc=46.30 μg·min·ml-1,cmax=0.89 μg·ml-1,tmax=18.03 min; and for tablets of isoflavone aglycone:auc=36.01 μg·min·ml-1，cmax=0.41 μg·ml-1，tmax=31.43 min. the relative bioavailability of dripping pills and tablets was 128%. conclusion the pharmacokinetics of dripping pills and tablets of aglycone isoflavone were in accordance with single compartment model，and the relative bioavailability of dripping pills of aglycone isoflavone was higher.
key words:isoflavone aglycone drippping pills; isoflavone aglycone tablets; hplc; pharmacokinetics; relative bioavailability
异黄酮苷元(isoflavone aglycone)是一种来源于豆类植物的游离苷元，包括染料木素、黄豆苷元、黄豆黄素3种活性成分，其中染料木素的结构与雌二醇相似，且含量最高，生物活性最强[1]。异黄酮苷元是一种具有较强的抗氧化活性和神经保护作用的植物雌激素，在防治老年性痴呆和由于雌激素缺乏导致的骨质疏松等方面有良好的应用前景[2]。但异黄酮苷元难溶于水，生物利用度低，影响了其在体内的生物活性。本实验通过考察自制异黄酮苷元滴丸[3]和片剂[4,5]的药代动力学特征，为异黄酮苷元滴丸的临床应用提供依据。
广东药学院学报 第25卷 第6期 杨红,等.异黄酮苷元滴丸和片剂在大鼠体内的相对生物利用度研究
1 材料与仪器
1.1 材料
异黄酮苷元滴丸和片剂是由本实验室从大豆中提取制备的游离苷元研制而成(平均丸重25.03 mg·丸-1，染料木素含量为133.2 mg·g-1;平均片重453.84 mg·片-1，染料木素含量为5.40 mg·g-1);染料木素对照品(上海同田生化技术有限公司);无水甲醇(分析纯,天津市科密欧化学试剂有限公司);磷酸(分析纯,沈阳 经济 技术开发区试剂厂);甲醇(色谱纯,tedia公司);异黄酮苷元滴丸灌胃液(精确称取0.05 g滴丸细粉，0.5%羧甲基纤维素钠定容到100 ml，得到含染料木素66.6 μg·ml-1的灌胃液);异黄酮苷元片剂灌胃液(精确称取1.234 g片剂细粉，0.5%羧甲基纤维素钠定容到100 ml，得到含染料木素66.6 μg·ml-1的灌胃液);其余试剂均为分析纯。
1.2 动物
sd大鼠36只，鼠龄8～12周，体质量(200±10)g，广州中医药大学实验动物中心，许可证号：scxk(粤)20080020，粤监证字2008a002。
1.3 仪器
p680a高效液相色谱仪(美国戴安公司);re52cs旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);低sh2d循环水试真空泵(巩义市予华仪器有限责任公司);数显恒温水浴锅(江苏省宏华仪器厂);xw80型旋涡混合器(上海第一医学院仪器厂);高速离心机(日本日立公司)。
2 实验方法
2.1 对照品溶液的制备
取空白血浆6份,分别精密加入染料木素对照品制得质量浓度分别为0.05、0.10、0.20、0.40、0.80、1.60 μg·ml-1的对照品溶液，4 ℃保存备用。
2.2 色谱条件
参照 文献 [6,7]进行改进：色谱柱为diamonsil c18色谱柱 (250 mm×4.6 mm，5 μm);柱温为25 ℃;流动相为甲醇0.3%磷酸溶液(体积比48∶52);流速为0.7 ml·min-1;测定波长为254 nm;进样量为20 μl。
2.3 血浆样品预处理
取血浆1 ml， 加入1 ml乙酸乙酯， 涡旋振荡
2 min，3 000 r·min-1离心5 min，移取上层有机相于另一试管中;将下层溶液重复上述步骤，合并有机相溶液，通风橱中挥干，残留物加无水甲醇溶解，0.45 μm微孔滤膜过滤，用无水甲醇定容于2 ml容量瓶，得血浆样品溶液。
2.4 方法专属性
在“2.2”项色谱条件下，测得空白血浆、对照品血浆(含染料木素)、样品血浆(含异黄酮苷元)的色谱图见图1。从图1可见，血浆中的杂质不干扰测定。
2.5 标准曲线[8]
取“2.1”项下的对照品溶液，按“2.3”项下处理并进样测定，以染料木素溶液的质量浓度为横坐标,相对应的染料木素的峰面积为纵坐标,用最小二乘法进行线性回归 计算 ，得回归方程为y=3272.06 x-1.87，r=0.999 9。表明染料木素对照品的质量浓度在0.05～1.60 μg·ml-1(n=6)范围内与峰面积呈良好的线性关系。
2.6 精密度试验
取空白血浆1.0 ml，按“2.3”项下处理，制得高、中、低3种浓度(1.60、0.80、0.40 μg·ml-1)的样品溶液，分别于1 d内和3 d内连续进样5次测定，并计算rsd值，结果见表1。表1 精密度试验结果
2.7 相对回收率试验
精密吸取血浆样品3份，按“2.3”项下操作处理，得血浆样品溶液并根据标准曲线计算样品溶液浓度，将所得浓度与实际浓度的比值即相对回收率，见表2。表2 相对回收率结果
2.8 稳定性考察
取“2.1”项下的3种浓度(1.60、0.80、0.40 μg·ml-1)的溶液，分别于0、2、4、6、8、12 h进样分析，结果显示溶液中染料木素的rsd为0.83%，表明样品溶液在4 ℃避光条件下12 h内稳定。
2.9 血浆样品测定
取sd大鼠36只，随机分成2组，隔夜禁食，分别灌胃给予异黄酮苷元滴丸灌胃液或异黄酮苷元片剂灌胃液(2 ml·只-1),于灌胃后0、5、10、15、30、45、60、75、90、105、120、150 min对大鼠进行眼眶取血(约1.5 ml·只-1)， 置肝素试管中抗凝， 5 000
r·min-1离心5 min，分离上清液，得血浆样品。按“2.3”项下方法处理得到血浆样品溶液并进行测定，利用回归方程求出血药浓度。
3 结 果
3.1 血药浓度测定结果
按不同时间点求出平均血药浓度，并绘制血药浓度-时间曲线，见图2、3。由图可见：15 min时滴丸的血药浓度为0.706 μg·ml-1，片剂的血药浓度为0.405 μg·ml-1，相比其他时间点，此采血点的血药浓度最高。
3.2 药动学参数
血药浓度数据经药代动力学软件3p87拟合处理后，药动学参数结果见表3。从表3可见：异黄酮苷元滴丸和片剂均符合一室模型;滴丸和片剂的主要药代动力学参数具有明显的差别，滴丸在18.03 min时达到血药浓度峰值0.89 μg·ml-1，而片剂出现2个峰值，分别在15 min和75 min，血药浓度峰值为0.41 μg·ml-1和0.365 μg·ml-1;滴丸的auc为46.30 μg·min·ml-1，而片剂的为36.01 μg·min·ml-1，滴丸的相对生物利用度约为片剂的128%。表3 异黄酮苷元滴丸和片剂药代动力学参数
4 讨 论
异黄酮苷元具有苯并吡喃酮结构，有较强的紫外吸收，3种活性成分均难溶于水[9]，影响了其在体内的吸收利用。本实验对自制异黄酮苷元滴丸和片剂的药代动力学特征和生物利用度考察，结果显示滴丸的血浆药物浓度-时间曲线为单峰，而片剂表现为双峰，说明片剂可能在大鼠体内存在肝肠循环;异黄酮苷元滴丸生物利用度为片剂的1.28倍，说明滴丸可显著改善和提高异黄酮苷元在体内吸收和代谢，在一定程度上解决了异黄酮苷元难溶于水，生物利用度低的问题。本文结果为进一步的体内研究提供了依据。
【 参考 文献 】
血液的化学元素范文第2篇
【摘要】 目的 研究异黄酮苷元滴丸和片剂的药动学及相对生物利用度。方法 以sd大鼠为实验动物，采用高效液相色谱法测定异黄酮苷元滴丸和片剂单剂量灌胃给药后大鼠的血药浓度变化。用3p97软件进行药代动力学数据处理， 计算 分析药代动力学参数和相对生物利用度。结果 异黄酮苷元滴丸：auc为46.30 μg·min·ml-1，cmax为0.89 μg·ml-1，tmax为18.03 min;片剂：auc为36.01 μg·min·ml-1，cmax为0.41 μg·ml-1，tmax为31.43 min，滴丸相对于片剂的相对生物利用度为128%。结论 异黄酮苷元滴丸、片剂均符合一室模型，滴丸较片剂具有较高的生物利用度。本研究为异黄酮苷元滴丸研制提供了一定的依据。
【关键词】 异黄酮苷元滴丸;异黄酮苷元片剂;高效液相色谱法;药代动力学;相对生物利用度
abstract:objective to investigate the pharmacokinetic and relative bioavailability of isoflavone aglycone dripping pills and tablets in healthy sd rats,and evaluate the pharmacokinetic effects of the two dosage forms of isoflavone aglycone. methods 36 sd rats were intragastrically administered with the suspension solution of isoflavone aglycone dripping pills and tablets at single dose,and changes in plasma concentration were determined by hplc. pharmacokinetic data were processed with 3p97 software and the pharmacokinetic parameters and relative bioavailability were calculated. results for dripping pills of isoflavone aglycone:auc=46.30 μg·min·ml-1,cmax=0.89 μg·ml-1,tmax=18.03 min; and for tablets of isoflavone aglycone:auc=36.01 μg·min·ml-1，cmax=0.41 μg·ml-1，tmax=31.43 min. the relative bioavailability of dripping pills and tablets was 128%. conclusion the pharmacokinetics of dripping pills and tablets of aglycone isoflavone were in accordance with single compartment model，and the relative bioavailability of dripping pills of aglycone isoflavone was higher.
key words:isoflavone aglycone drippping pills; isoflavone aglycone tablets; hplc; pharmacokinetics; relative bioavailability
异黄酮苷元(isoflavone aglycone)是一种来源于豆类植物的游离苷元，包括染料木素、黄豆苷元、黄豆黄素3种活性成分，其中染料木素的结构与雌二醇相似，且含量最高，生物活性最强[1]。异黄酮苷元是一种具有较强的抗氧化活性和神经保护作用的植物雌激素，在防治老年性痴呆和由于雌激素缺乏导致的骨质疏松等方面有良好的应用前景[2]。但异黄酮苷元难溶于水，生物利用度低，影响了其在体内的生物活性。本实验通过考察自制异黄酮苷元滴丸[3]和片剂[4,5]的药代动力学特征，为异黄酮苷元滴丸的临床应用提供依据。
广东药学院学报 第25卷 第6期 杨红,等.异黄酮苷元滴丸和片剂在大鼠体内的相对生物利用度研究
1 材料与仪器
1.1 材料
异黄酮苷元滴丸和片剂是由本实验室从大豆中提取制备的游离苷元研制而成(平均丸重25.03 mg·丸-1，染料木素含量为133.2 mg·g-1;平均片重453.84 mg·片-1，染料木素含量为5.40 mg·g-1);染料木素对照品(上海同田生化技术有限公司);无水甲醇(分析纯,天津市科密欧化学试剂有限公司);磷酸(分析纯,沈阳 经济 技术开发区试剂厂);甲醇(色谱纯,tedia公司);异黄酮苷元滴丸灌胃液(精确称取0.05 g滴丸细粉，0.5%羧甲基纤维素钠定容到100 ml，得到含染料木素66.6 μg·ml-1的灌胃液);异黄酮苷元片剂灌胃液(精确称取1.234 剂细粉，0.5%羧甲基纤维素钠定容到100 ml，得到含染料木素66.6 μg·ml-1的灌胃液);其余试剂均为分析纯。
1.2 动物
sd大鼠36只，鼠龄8～12周，体质量(200±10)g，广州中医药大学实验动物中心，许可证号：scxk(粤)2008?0020，粤监证字2008a002。
1.3 仪器
p680a高效液相色谱仪(美国戴安公司);re52cs旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);低sh2?d循环水试真空泵(巩义市予华仪器有限责任公司);数显恒温水浴锅(江苏省宏华仪器厂);xw?80型旋涡混合器(上海第一医学院仪器厂);高速离心机(日本日立公司)。
2 实验方法
2.1 对照品溶液的制备
取空白血浆6份,分别精密加入染料木素对照品制得质量浓度分别为0.05、0.10、0.20、0.40、0.80、1.60 μg·ml-1的对照品溶液，4 ℃保存备用。
2.2 色谱条件
参照 文献 [6,7]进行改进：色谱柱为diamonsil c18色谱柱 (250 mm×4.6 mm，5 μm);柱温为25 ℃;流动相为甲醇?0.3%磷酸溶液(体积比48∶52);流速为0.7 ml·min-1;测定波长为254 nm;进样量为20 μl。
2.3 血浆样品预处理
取血浆1 ml， 加入1 ml乙酸乙酯， 涡旋振荡
2 min，3 000 r·min-1离心5 min，移取上层有机相于另一试管中;将下层溶液重复上述步骤，合并有机相溶液，通风橱中挥干，残留物加无水甲醇溶解，0.45 μm微孔滤膜过滤，用无水甲醇定容于2 ml容量瓶，得血浆样品溶液。
2.4 方法专属性
在“2.2”项色谱条件下，测得空白血浆、对照品血浆(含染料木素)、样品血浆(含异黄酮苷元)的色谱图见图1。从图1可见，血浆中的杂质不干扰测定。
2.5 标准曲线[8]
取“2.1”项下的对照品溶液，按“2.3”项下处理并进样测定，以染料木素溶液的质量浓度为横坐标,相对应的染料木素的峰面积为纵坐标,用最小二乘法进行线性回归 计算 ，得回归方程为y=3272.06 x-1.87，r=0.999 9。表明染料木素对照品的质量浓度在0.05～1.60 μg·ml-1(n=6)范围内与峰面积呈良好的线性关系。
2.6 精密度试验
取空白血浆1.0 ml，按“2.3”项下处理，制得高、中、低3种浓度(1.60、0.80、0.40 μg·ml-1)的样品溶液，分别于1 d内和3 d内连续进样5次测定，并计算rsd值，结果见表1。表1 精密度试验结果
2.7 相对回收率试验
精密吸取血浆样品3份，按“2.3”项下操作处理，得血浆样品溶液并根据标准曲线计算样品溶液浓度，将所得浓度与实际浓度的比值即相对回收率，见表2。表2 相对回收率结果
2.8 稳定性考察
取“2.1”项下的3种浓度(1.60、0.80、0.40 μg·ml-1)的溶液，分别于0、2、4、6、8、12 h进样分析，结果显示溶液中染料木素的rsd为0.83%，表明样品溶液在4 ℃避光条件下12 h内稳定。
2.9 血浆样品测定
取sd大鼠36只，随机分成2组，隔夜禁食，分别灌胃给予异黄酮苷元滴丸灌胃液或异黄酮苷元片剂灌胃液(2 ml·只-1),于灌胃后0、5、10、15、30、45、60、75、90、105、120、150 min对大鼠进行眼眶取血(约1.5 ml·只-1)， 置肝素试管中抗凝， 5 000
r·min-1离心5 min，分离上清液，得血浆样品。按“2.3”项下方法处理得到血浆样品溶液并进行测定，利用回归方程求出血药浓度。
3 结 果
3.1 血药浓度测定结果
按不同时间点求出平均血药浓度，并绘制血药浓度-时间曲线，见图2、3。由图可见：15 min时滴丸的血药浓度为0.706 μg·ml-1，片剂的血药浓度为0.405 μg·ml-1，相比其他时间点，此采血点的血药浓度最高。
3.2 药动学参数
血药浓度数据经药代动力学软件3p87拟合处理后，药动学参数结果见表3。从表3可见：异黄酮苷元滴丸和片剂均符合一室模型;滴丸和片剂的主要药代动力学参数具有明显的差别，滴丸在18.03 min时达到血药浓度峰值0.89 μg·ml-1，而片剂出现2个峰值，分别在15 min和75 min，血药浓度峰值为0.41 μg·ml-1和0.365 μg·ml-1;滴丸的auc为46.30 μg·min·ml-1，而片剂的为36.01 μg·min·ml-1，滴丸的相对生物利用度约为片剂的128%。表3 异黄酮苷元滴丸和片剂药代动力学参数
4 讨 论
异黄酮苷元具有苯并吡喃酮结构，有较强的紫外吸收，3种活性成分均难溶于水[9]，影响了其在体内的吸收利用。本实验对自制异黄酮苷元滴丸和片剂的药代动力学特征和生物利用度考察，结果显示滴丸的血浆药物浓度-时间曲线为单峰，而片剂表现为双峰，说明片剂可能在大鼠体内存在肝肠循环;异黄酮苷元滴丸生物利用度为片剂的1.28倍，说明滴丸可显著改善和提高异黄酮苷元在体内吸收和代谢，在一定程度上解决了异黄酮苷元难溶于水，生物利用度低的问题。本文结果为进一步的体内研究提供了依据。
【 参考 文献 】
血液的化学元素范文第3篇
关键词:运动性贫血;Fe;Zn;Ca
中图分类号:G804.7 文献标识码:A 文章编 号:1007-3612(2010)09-0066-04
The Effect of Sports Anemia on Fe、Zn、Ca in Rats’ Serum
ZHANG Xiaoli
(Luoyang Institute of Science and Technology, Luoyang 471023, H enan China)
Abstract:objective:The purpose of this research was to monitor and evalu ate the dynamic changes ofthese three elements(Fe, Zn and Ca)periodically by building an animal model ofsports anemia. The paper studies the regularity of the changes to provide refe rence for the diagnoses of sports anemia in the future and propose suggestions f or the athletes to supply some nutrient elements in the time during longterm e xhaustive training. Results: by comparing with the control group, the paper fou nd that the trend of Fe, Zn and Ca in serum of rats had respective characteristi cs: Fe in serum of rats in the sports anemia group and the control group increas ed obviously, but Fe in serum of rats in the sports anemia group was less obviou sly compared with control group, while Zn and Ca have no significant changes.
Key words: sports anemia; Fe; Zn; Ca
运动性贫血的概念是1959年由日本学者Yochimura首先提出,是指贫血的发生与运动训 练有密切关系或直接由运动训练造成的一种特殊贫血,是由于机体无法适应长时间大强度运 动而引起血红蛋白浓度下降从而导致机体一系列生理、病理变化[1,2]。本研究采 用长期递 增负荷训练建立运动性贫血大鼠模型,通过对比观察造模组和对照组中大鼠血清中Fe、Zn、 Ca三种元素变化趋势和规律,为今后进一步研究长期运动对运动员血液三种元素含量的影响 提供参考,为运动员合理补充微量元素提供科学依据。
1 研究对象与方法
1.1 研究对象 雄性Wistar大鼠16只,体重(199±10)g,购于北京维通利华实验动物技术有限公司,动物 许可证号:SCXK(京)2007-0001,动物级别:SPF级。随机分为对照组(8只)和递增负荷 跑台造模组(简称造模组,8只)。动物饲养环境温度(23±2)℃,湿度40%～60%。分笼饲养 , 每笼4只,自由饮食,自然节律光照。动物饲料为全价营养颗粒饲料,购于北京科澳协力饲 料有限公司,产品许可证号:SCXK(京)2005-0007,铁含量>100 mg/1 000 g。
1.2 实验方案
1.2.1 造模方案 造模组的运动方案依据赵杰修、曹建民等应用的运动性贫血动物模型的建立方法[1,3 ] 。造模组进行递增负荷跑台训练(BCPT-202型)5周,动物跑台坡度为0°,跑台速度为30 m /min,每周训练6天。前2周每天进行1次训练,其余时间为每天上、下午各训练一次,每周 休息一天。运动性贫血模型建立的训练安排计划为:第1次训练时间为1 min,之后以2 min /次的频率进行递增,最后一次的训练时间为95 min;若训练中大鼠出现严重力竭症状(连 续施加机械刺激,大鼠不能继续跑、下跑台后腹部触地严重呈“甲鱼状”),允许其休息3- 5 min。运动组跑台训练安排详情见表1。
1.2.2 取样及测试方法 外周血测试:实验大鼠在正式实验开始前24 h、建模期最后一次训练结束后24 h,内眦取血 20 μL,采用日本光电工业株式会社生产的MEK-6318K血
投稿日期:2009-12-30
作者简介:张笑莉,副教授,研究方向运动人体科学。
球计数仪测定红细胞数(RBC)、血红蛋白(Hb)和红细胞压积(Hct)等指标。
血液中三种微量元素的测试:实验大鼠在测定血象指标取血样的同时,取40 μL血液,加入 到MB5稀释液(生产批号:3301060721)中,采用 MB5多元素血液分析仪(北京普析通用仪 器有限责任公司)测定。
1.3 数理统计 数据采用SPSS13.0统计软件包进行统计学处理,选用配对T检验对造模组及对照组造模 前后各指标进行统计处理,采用独立样本T检验对造模前及造模后造模组和对照组各指标进 行统计处理(P
2 结 果
2.1 造模期大鼠体重、RBC、Hb、Hct的变化 5周的递增负荷跑台运动后,造模组大鼠体重较对照组大鼠的体重出现显著的下降(对 照组(405.7±21.04)g,造模组(301.0±24.80)g,p
2.2 运动贫血对大鼠血液中Fe、Zn、Ca元素变化的影响 运动性贫血造模过程中,对照组和造模组血液Fe浓度均有明显上升趋势,但造模前后对 照组、造模组组间均无显著差异;对照组、造模组大鼠血液中Zn和Ca浓度造模前后没有明显 改变(表3)。
3.1 大鼠外周血液RBC、Hb、Hct的变化 运动性贫血动物模型的建立是进行运动性贫血机制研究的关键环节。自从运动性贫血概 念提出,国内外学者就展开了建立运动性贫血动物模型的研究[1-6]。运动性贫血 原因极其 复杂,运动性贫血的动物模型迄今为止尚没有一致认可的模型建立。在已有的动物模型中 [ 1-6],运动方式多为游泳、跑台运动,动物多为大鼠。贫血模型成功建立的重要标准为 贫血 动物的Hb、RBC、Hct较对照动物显著降低[1,3,7]。本研究中运动性贫血动物大鼠 模型采用 赵杰修、曹建民等[1,3]建立的运动性贫血大鼠模型的建立方法,五周的递增负荷 跑台运 动使建模组的RBC、Hb和Hct由运动开始前的(8.41±0.59)1012/L、(152.91± 8 .90)g/L和(43.16±3.22)L/L下降到建模结束时的(6.89±0.76)(1012/L)、(1 36.12±15.65)g/L和(37.24±5.01)L/L(p
3.2 运动贫血对大鼠血液中Fe含量的影响 铁是人体内含量丰富的必需金属元素,也是运动性贫血领域研究最多的微量元素之一。 铁参与血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素氧化酶、过氧化物酶及触酶的合成,并与乙酰辅酶A 、琥珀酸脱氢酶及细胞色素还原酶的活性密切相关,是维持人体各种正常生理功能所不可缺 少的物质。一般正常成人体内铁的总含量为3～5 g,其中,60%～70%是以血红蛋白(Hb)的
形式存在于血液中,可作为O2的运输载体;3%的铁以肌红蛋白(Mb)的形式贮存在肌细胞 中;26%～36%的铁以铁蛋白或含铁血黄素的形式储存于肝、脾、骨髓等组织中;还有一些 铁存在于电子传递链的细胞色素酶中,参与ATP的形成。铁的缺失可直接影响O2的运输和 肌肉有氧氧化能力及ATP的形成,导致机体缺氧,脑细胞缺氧,导致头晕眼花,注意力不集 中;肌细胞缺氧,导致全身乏力,进而影响运动能力和技术水平的正常发挥[8,9] 。
一般认为,运动性贫血可能发生的机理包括:血液稀释、血管内溶血、女性运动员的月 经紊乱及膳食结构和饮食方法的不合理等,目前尚无定论[1]。血液稀释,是运动 时使血浆 容量增加,从而导致单位容积中的血红蛋白和红细胞相对减少。血容量增加的程度和运动强 度、运动量密切相关。因此,优秀耐力运动员的血容量增加更加明显[2]。一般认 为,高血 浆容量反应,血红蛋白、红细胞压积浓度相对下降是机体适应性发挥、动员的表现,其可刺 激、动员红细胞生成素系统,同时还可降低血液粘滞度,减少外周阻力,利于血液的灌流和 氧的输送[10]。对于这种血液中红细胞相对值减少而绝对值未减少的现象,称为“ 假性运动性贫血”或“暂时性贫血”。
本研究中,运动性贫血造模成功后,对照组和造模组Fe含量均有有显著性提高,区别在 于对照组大鼠血液Fe元素出现了非常显著的提高,造模前后对照组与贫血组皆无显著差异( 表3)。这与实验预计的结果具有很大的差异,运动性贫血造模成功后,Fe元素含量不降 反升,分析其主要原因:第一,5周的递增负荷跑台运动刺激使造模组大鼠的血浆容量反应 ,血红蛋白、红细胞压积浓度出现相对降低,出现“暂时性运动贫血”,即血液稀释,但造 成的贫血对单位血液中Fe元素的含量没有明显影响;第二,据表3可知,对照组5周后Fe元素 的含量有非常显著性提高,这说明大鼠血液中Fe元素的含量随周龄增加而增加,而5周的递 增负荷跑台运动刺激并不能使造模组大鼠血液中Fe元素的含量较造模前出现明显下降。
实验结果显示造模组大鼠血液Fe元素含量在5周的递增负荷跑台运动的刺激下只出现明 显增加,而对照组出现非常显著增加,表明造模组大鼠Fe元素含量相对有所下降。因此,运 动性贫血仍将一定程度上影响血液中Fe元素的含量,影响运动能力和技术水平的发挥,长期 运动训练期间及时补充Fe仍是十分必要的。
3.3 运动贫血对大鼠血液中Zn含量的影响 锌广泛存在于机体各种脏器中,参与组织、细胞和生物分子的构成,是人体必需的微量 元素。锌是脑组织含量最高的微量元素,能抑制r-氨基丁酸合成酶的作用。缺锌早期表现是 味觉减退、食欲下降,导致学习记忆力下降、伤口不易愈合、生殖器官发育受损等现象。锌 是很多酶的组成成分,与酶的活性密切有关。锌具有抑制脂质过氧化、抗自由基损伤的作用 。近年来有研究表明[8],运动训练可致自由基生成增加,而锌通过不同途径在抗 自由基损 伤中发挥作用。不同的锌含量水平对机体清除自由基的能力是不同的。过多或过少的锌含量 均不能最大程度发挥锌的积极作用。另有实验表明[9],锌与骨骼肌正常功能和疲 劳能力有 关。运动引起锌变化的原因是:剧烈持续性耐力运动一开始引起血浆和血清锌浓度的升高, 可能与骨骼肌蛋白分解、锌从肌肉转移到细胞外液有关。运动后的短时期内,血浆锌浓度下 降,可能是由于尿排出的锌增加和锌从血浆到肝脏的转移。软组织损伤也会降低血浆锌浓度 。短时间运动中,血清锌显著升高。耐力活动中,血清锌稍升高,在第二日可恢复到运动前 水平。
结果显示,造模过程中对照组大鼠血液中Zn变化没有显著差别(P>0.05),运动贫血造 模 组大鼠血液中Zn也无显著变化。造模前后对照组与贫血组皆无显著差异(P>0.05)。 本 实验结果表明血液中Zn浓度的变化与运动性贫血没有明显关联。也就是说,出现运动性贫血 不能使血液中Zn含量出现明显变化。与本研究结果相似的是,李晓新等认为[11], 在潜在性缺铁性贫血的运动员中,与造血无关的微量元素Zn在正常范围。
3.4 运动贫血对大鼠血液中Ca含量的影响 钙在维持身体结构和细胞功能方面发挥着重要作用,几乎体内的各种细胞功能均与钙离子( Ca2+)调节有关,细胞Ca2+代谢异常会引起机体各种功能障碍[12]。 钙是骨盐的主要 成分,Ca2+具有维持神经肌肉正常兴奋性、降低神经肌肉的应激性、参与肌肉收缩、 降低毛细血管及细胞膜通透性的作用,同时是细胞信息传递的第二信使[13]。竞技 运动员在 运动训练和比赛中需要很高的灵敏素质、反应速度、心脏泵血能力和肌肉力量。这些运动能 力的提高都与钙离子的存在有十分重要的关系。而运动员在训练比赛中钙离子丢失非常大, 因此高钙摄入对运动能力保持和提高有积极意义。
目前关于钙摄入量与运动能力关系的直接研究报道并不多。但许多研究发现,自一定运 动强度开始起,血钙浓度上升持续到运动终止。运动停止后,血钙逐渐下降至低于安静值再 恢复[14]。运动停止后24 h,组织间质钙上升,肌浆钙、线粒体钙也上升,三个环 境中的钙 在一段时间内同时上升,说明动员的钙量很大[15]。随着钙量需求增加,肌细胞游 离钙浓度 下降时,肌球蛋白ATP酶活性会下降,肌肉收缩力下降,因而运动后应注意钙的补充。有研 究发现,适宜的高钙摄入对运动小鼠的运动能力提高、运动后内环境稳态的恢复和亚细胞结 构与功能的保护,都具有明显促进作用[16]。
本研究结果中,运动性贫血造模过程中,贫血造模组血液Ca浓度增高,但是不具有显著 性差异。增高的原因是运动开始起,动员的钙量增加,血钙浓度有上升持续到运动终止。另 外,运动停止后24 h,组织间质钙上升,肌浆钙、线粒体钙也上升,三个环境中的钙在一段 时间内同时上升,之后逐渐下降。本次采血是在建模结束后24 h,因而出现Ca含量的上升, 但没有显著性差异。
4 结 论
五周的递增负荷跑台运动,成功建立运动性贫血动物模型。运动性贫血造模过程中,贫 血造模组和对照组大鼠血液Fe浓度随周龄增长较造模前显著性升高,但造模组大鼠Fe单位含 量相对对照组有所降低,另外运动性贫血不能使血液中Zn、Ca含量出现明显变化。因此,长 期运动训练期间及时补充Fe仍是十分必要的。
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血液的化学元素范文第4篇
【摘要】 目的测定四物汤及其单味药中Fe，Cu，Mg，Ca，Mn，Zn 6种金属元素的含量，建立中药复方中微量金属元素检测的方法。方法用蒸馏水微波提取样品，运用火焰原子吸收光谱法测定，采用标准曲线法拟合计算含量。结果所测定的四物汤及其单味药中含有丰富的人体必需微量元素。结论该方法操作简单、结果准确，为中药复方中微量金属元素检测的理想方法。
【关键词】 火焰原子吸收光谱法； 四物汤； 金属元素
出自《和剂局方》的四物汤，是中医理血药之首。该方组成为：熟地15 g，当归、白芍各10 g，川芎6 g。功效与主治：补血养血，活血调经。该药用于血虚血滞所致的月经不调、痛经，是一切血虚常见的头晕眼花、面色无华、心悸、唇白、舌淡、脉细等症候的基本治疗方剂。一般来说，中药中的有效成分主要是由于其有机成分决定的，但无机离子的存在对其药效的发挥也有很重要的作用，人体如果缺乏铁、锌等元素都会造成一定程度的贫血。因此，中草药中无机元素的测定对于其药效的佐证有很重要的意义［1］。
1 仪器与试剂
1.1仪器
TAS-990型原子吸收分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；Fe，Cu，Ca，Mn，Zn，Mg空心阴极灯〔威格拉斯（北京）有限公司〕；New Human UP 900超纯水器(韩国New Human公司)；WX-4000微波快速反应系统（上海屹尧分析仪器有限公司）。
1.2 试剂
18.3 MΩ·cm超纯水（用单蒸水经上述超纯水器制得）；浓硝酸(优级纯，前进化学试剂厂）；Fe，Cu，Ca，Mn，Zn，Mg标准溶液，含量均为1 000 μg·ml-1（国家标准物质研究中心）。
2 方法与结果
2.1 稀释剂及标准溶液的制备
2.1.1 稀释剂用优级纯的硝酸和超纯水配制成质量分数为1%的稀硝酸，作为Fe，Cu，Zn，Mn标准溶液的稀释剂。称取1 g氯化锶，1 g氯化钾和1%硝酸配成混合溶液，作为钙和镁标准溶液的稀释剂。
2.1.2 标准溶液取上述6种元素标准溶液用稀释剂配制成相应浓度的溶液，其中Fe，Cu，Zn，Mn配制成混合标准溶液，Ca，Mg配制成混合标准溶液。配制的标准溶液的浓度见表1。表1 6种元素配制的系列标准溶液（略）
2.2 样品的处理熟地、当归、白芍和川芎均购自赣州市青年路华尔康大药房，切成碎片，放入烘箱内于85℃时烘2～3 h。按以下顺序配好药物，样品1：四物汤（熟地15 g，当归、白芍各10 g，川芎6g）；样品2：单味熟地40 g；样品3：单味当归40 g；样品4：单味白芍40 g；样品5：单味川芎40 g。
分别将上述5个样品用400 ml蒸馏水于微波快速反应仪上80℃萃取30 min，同时制作蒸馏水样为空白，萃取完后所得的溶液中先用四层纱布过滤，后用中性滤纸滤除溶液中的微小残渣，再经减压蒸馏（70℃）除掉大部分水分后，把溶液小心转移至50 ml容量瓶中，用1%的硝酸溶液稀释至刻度待用，同时用稀释液清洗减压瓶。测量钙、镁时从中取5 ml，加入钙镁稀释剂至100 ml，使测试液稀释20倍后测量。在测试过程中，如果某种元素的吸光度比较高，高于线性范围时采取加稀释液稀释的办法，使其吸光度值在线性范围内。
2.3 标准方程建立依据所配制的标准溶液，按原子吸收仪器操作步骤对仪器进行设置，除Zn元素的燃气流量改为1 500 ml·min-1，其他参数均为系统提供的专家数据，实验过程中仪器参数及工作方程见表2。表2 6种元素测定时的标准方程和相关系数（略）
2.4 检测结果根据上述方法，把所测样品中金属元素的含量乘以稀释倍数再除以样品重，得每克样品中所含元素的质量，所检测的四物汤及其单味药样品中6种金属元素的含量。见表3。表3 四物汤及其单味药中6种金属元素的含量 （略）
3 结论
从表1中可以看出，四物汤的单味药提取液中金属元素含量各不相同，其中含Fe和Ca最多的为熟地，含Cu和Mn最多的是川芎，含Zn和Mg最多的是当归，而白芍中除了Ca元素外，Fe，Cu，Zn，Mn，Mg 5种元素的含量是最低的。四物汤由于是四味药的复方，所检测的6种金属元素含量都相对较高。这些金属元素的存在及其含量与其补血功能之间存在一定的关系，与文献［2］报道的四物汤单味药物的补血效果低于复方药的综合效果相一致。
已知人体内有超过50%的酶的活性与金属元素的存在有关。人体缺铁、缺铜和缺锌都会造成贫血，四物汤水提取液中除有机化合物在补血方面有充分的作用外，其含有的金属元素所起的作用也不容忽视。但人体的金属元素含量也并不是越多越好，现代医学研究表明，过量的铁、铅、锌、锰、钙和镁等会造成元素中毒，而四物汤中各种元素的含量正好扬长避短，使其整体的金属元素含量对于人体不过量。
本方法检测快速准确，适宜中药中元素含量的测定。
参考文献
血液的化学元素范文第5篇
【摘要】
目的 探讨体外模拟缺血再灌注后大鼠皮质神经元内质网应激诱导凋亡的机制及丹红注射液对其的干预作用。方法 体外培养大鼠皮质神经元，神经元特异性烯醇酶（NSE）鉴定神经元纯度。建立体外培养大鼠皮质神经元模拟缺血再灌注模型，随机分为对照组（始终正常培养）、缺血再灌注组（体外模拟缺血再灌注）、治疗组（缺血再灌注加丹红注射液干预），应用免疫组织化学、免疫荧光染色方法鉴定神经元纯度；流式细胞术Annexin V、PI双标检测神经元凋亡率及活性半胱天冬酶(Caspase)3、Caspase8、Caspase9蛋白表达；Westernblot免疫印迹分析法检测活性Caspase12、葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、Bcl2及细胞色素C蛋白表达。结果 大鼠皮质神经元可纯化体外培养。皮质神经元体外模拟缺血6 h再灌注24、 48 h细胞凋亡率分别为（17.95±1.03）％、（22.62±0.98）％，丹红治疗组（8 mL/L)分别为（9.74±0.56）％、 （3.93±0.23）％，两组比较差异有统计学意义（χ2=7.164、10.650，P0.05）。神经元缺血再灌注后细胞色素C表达增加，Bcl2表达减少，活性Caspase3、Caspase8、Caspase9表达增加，丹红注射液治疗后细胞Bcl2表达增加，细胞色素C释放减少，活性Caspase3、 Caspase8、Caspase9含量降低，两组比较差异有显著性（t=8.374～25.235，P
【关键词】 神经元 再灌注损伤 内质网 应激 半胱天冬酶 丹红注射液 大鼠 Sprague Dawley
［ABSTRACT］ Objective To study the protection effect of danhong injection on rat cortical neurons during apoptotic induction of simulated ischemia/reperfusion in vitro. Methods Rat cortical neurons were cultured in vitro and identified by NSEimmunohistological staining and immunofluorescence staining. Neuronal ischemia/reperfusion models in vitro were established as followings: cultures were rinsed twice with PBS， then subjected to ischemia for 6 h in Earle’s without glucose by placing culture wells into an anaerobic chamber with an atmosphere of 0.05 CO2， 0.95 N2 at 37 ℃， reperfusion was performed by removing neuronal culture wells from the anaerobic chamber and adding normal medium to an incubator with an atmosphere of 0.05 CO2、 0.95 air at 37 ℃. Percentage of apoptotic cells and expression levels of active Caspase3，9，8 were determined by flow cytometric analysis. Protein levels of GRP78， Bcl2， Cyt C and active Caspase12 were assessed by immunoblotting. Results The apoptosis rate induced after reperfusion 24 h and 48 h was (17.95±1.03)% and (22.62±0.98)% respectively and was decreased to (9.74±0.56)% and (3.93±0.23)% after treated by danhong injection (8 mL/L) respectively (χ2=7.164，10.650;P
［KEY WORDS］ Neurons; Reperfusion Injury; Endoplasmic reticulum; Stress; Caspases; Salvia miltiorrhiza injection; Rats， SpragueDawley
凋亡是脑缺血后神经元死亡的一种重要形式。线粒体功能受损，细胞色素C自线粒体腔释放到胞浆是脑缺血后神经元凋亡关键的一步[1]。内质网是细胞表面蛋白及分泌蛋白合成、折叠、修饰和运输的场所。内质网应激引起的生理功能失调可发生在多种疾病中，如阿尔茨海默病、帕金森病、神经元缺血损伤、朊病毒病、囊性纤维病、糖尿病等[2]。近年来研究认为，内质网应激持续存在可迅速导致细胞凋亡[3]。Caspase12为半胱天冬酶家族成员之一，位于内质网，可特异性被内质网应激激活[4]。各凋亡信号转导途径及各细胞器之间存在着复杂的相互联系。脑缺血再灌注后神经元凋亡的发生机制目前还不十分清楚。本实验旨在探讨大鼠皮质神经元原代培养体外模拟缺血再灌注后细胞凋亡发生的机制，了解线粒体功能及内质网应激之间的相互关系，以及丹红注射液对其的干预作用。
1 材料与方法
1.1 材料
新生SD大鼠(出生24 h内)由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供；高糖DMEM、Neuronbasal培养液、B27、胎牛血清、马血清等均购自GibcoBRL公司；胰蛋白酶、L多聚赖氨酸购自Sigma公司；Annexin VFITC 购自Bender Med Systems公司；AntiCaspase12、AntiGRP78多克隆抗体分别购自Stressgen公司；Active Caspase3、Caspase9、 Caspase8试剂盒购自BioVision公司；Bcl2、细胞色素C试剂盒购自Santa Cruz Biotechnology公司；NSE组化检测试剂盒购自北京中山公司；其他试剂均为市售分析纯。CO2恒温细胞培养箱(Napco 5410220， USA)；荧光倒置显微镜（Olympus， JAPAN)；全自动酶标分析仪 (Thermo Electron Corporation Multiskan MK3， USA)；流式细胞仪（FACSCLSR，BectonDickton，USA)；激光扫描共聚焦显微镜(Olympus Fluoview FV 500 Imaging System，日本Olympus公司)。
1.2 方法
1.2.1 皮质神经元培养与鉴定 取出生24 h以内SD大鼠皮质于冷解剖液（4 ℃）中，剥离脑膜、血管，将脑组织剪成小于1 mm×1 mm×1 mm 的组织块，37 ℃水浴消化20 min， 加种植培养液(DMEM 中添加体积分数0.10胎牛血清及体积分数0.10马血清，pH 7.2～7.4) 终止消化并吹打，细胞悬液经200目滤网过滤，获得单细胞悬液，将1×106个细胞接种于预先包被多聚赖氨酸的35 cm培养皿。第2天更换维持培养液（Neuronbasal加体积分数0.02 B27），培养3～5 d半量换液，7～10 d用于实验。NSE免疫组织化学染色和IgG 免疫荧光染色(FITC 标记的兔抗鼠IgG 1∶200稀释) 鉴定神经元。
1.2.2 丹红注射液对原代神经元活力的影响 采用MTT法检测。取前述原代神经元（细胞密度1×106/L），按每孔100 μL接种于96孔板，培养5 d后随机分为空白对照组、阴性对照组、实验组，每组5个平行孔。实验组神经元加丹红注射液，终浓度分别为0.8、8.0、80.0 mL/L，分别继续培养1、2、3 d，每孔加入MTT 15 μL，37 ℃孵育4 h，镜下观察形成紫色针状结晶，小心弃去上清，每孔加入DMSO100 μL，室温下放置10 min，待镜下观察紫色结晶全部溶解后，以Dynatech MR 400 ELISA 读数仪测定波长570 nm处吸光度（A）值。
1.2.3 神经细胞体外模拟缺血再灌注模型的建立参照GOLDBERG等[5]的方法，取培养7～10 d 的神经元细胞，吸去原培养液，使用无糖Earle’s液洗2次后，加入无糖Earle’s液， 然后将细胞培养瓶或培养板置于可通气低氧罐内，向罐内持续缓慢通入含有体积分数0.95的N2和0.05的CO2混合气体以排除含氧的空气。通气30 min后，罐内含氧量低于0.01，夹闭低氧罐的进口与出口，置培养箱内密闭6 h（体外模拟缺血）。然后取出低氧罐，吸去无糖Earle’s液，换回维持培养液，放入恒温培养箱中继续培养24 h或48 h（再灌注）。
1.2.4 神经元凋亡检测 取上述分组培养的神经元胰蛋白酶消化后在4 ℃离心5 min， 去上清后细胞沉淀用冷PBS液洗2次， 加195 μL 结合缓冲液悬浮细胞， 然后加入Annexin VFITC 5 μL， 室温避光孵育10 min， 结合缓冲液洗3次，用190 μL结合缓冲液重悬细胞，加10 μL(20 mg/L)PI(终浓度1 mg/L)。流式细胞分析仪检测，重复3次。
1.2.5 活性Caspase3、Caspase9、Caspase8蛋白表达检测 前述各组及阴性对照组（正常培养的细胞培养液中加1 mL/L各种Caspase抑制剂共孵育）细胞（1×109/L）经消化、重悬，取300 μL细胞悬液于EP管中，每管分别加1 μL应用FITC标记的Caspase3、 Caspase9、 Caspase8，37 ℃体积分数0.05的CO2培养箱中孵育1 h。以3 000 r/min 离心5 min，弃上清，加入0.5 mL缓冲液重悬细胞，再以3 000 r/min离心5 min，弃上清，300 μL缓冲液重悬细胞，流式细胞分析仪检测，重复3次。
1.2.6 Caspase12、GRP78、细胞色素C和Bcl2表达检测 采用Westernblot免疫印迹分析法。各组细胞按照总蛋白提取试剂盒方法操作提取总蛋白，按蛋白定量试剂盒说明定量。免疫印迹操作参照ELYAMAN等[6]的方法进行。每组实验至少重复3次。利用激光扫描光密度分析法半定量测定细胞活性ActiveCaspase12、GRP78、细胞色素C以及Bcl2水平变化。
1.3 统计学处理
计量资料以±s表示。两组数据间比较采用t检验，多组数据间比较采用双因素方差分析，应用SPSS 12.0统计学软件进行数据计算。
2 结果
2.1 原代神经元培养
培养7 d的皮质神经元经NSE染色后， NSE阳性细胞占细胞总数的（92.69±4.10）%(n=5)。故可认为是纯神经元培养。
2.2 不同浓度丹红注射液对原代神经元活力影响
丹红注射液8.0 mL/L组第1～3天神经元的吸光度值高于对照组，80.0 mL/L组第2～3天神经元的吸光度值低于对照组，差异有显著性（F=35.551，q=3.081～5.326，P
表1 不同浓度丹红注射液对神经元活力的影响（略）
与对照组比较，F=35.551，*q=3.081～5.326，P
2.3 体外模拟缺血再灌注诱导的神经元凋亡
用Annexin VFITC和PI联合染色，可以区分正常细胞(两种染色均阴性)、早期凋亡细胞(Annexin VFITC阳性，PI阴性)、晚期凋亡或死亡细胞(两种染色均阳性)。通过流式细胞仪测定，正常培养大鼠皮质神经元经体外模拟缺血再灌注后，细胞凋亡明显增加，24 h凋亡率为（17.95±1.03）％，至48 h凋亡率为（22.62±0.98）％；治疗组在缺血的的同时加用8 mL/L丹红注射液，再灌注至24 h凋亡率为（9.74±0.56）％，48 h凋亡率为（3.93±0.23）％，两组比较，差异均有显著意义（χ2=7.164、10.650，P
2.4 活性Caspase3、 Caspase9、 Caspase8表达
原代培养的神经元经体外模拟缺血6 h后再灌注24、48 h，活性Caspase3、 Caspase9、 Caspase8的表达明显，加用8 mL/L丹红注射液，三者表达均显著下降(t=8.374～22.107，P
2.5 Caspase12、 GRP78、细胞色素C、Bcl2免疫印迹分析
免疫印迹分析显示，神经元缺血再灌注24、48 h后，神经元GRP78免疫活性明显增加，丹红治疗组GRP78活性减低，两组相比差异无显著性（t=0.976、1.750，P>0.05）。在缺血再灌注损伤24 h后，活性Caspase12表达增加，48 h时Caspase12表达下降；丹红治疗组活性Caspase12表达与对照组相似，两组比较差异无显著性（t=0.591、1.772，P>0.05）。缺血再灌注损伤神经元细胞色素C表达增加，而丹红治疗组表达减低；神经元Bcl2免疫活性在缺血再灌注后有较低表达，丹红治疗组Bcl2表达明显增强，治疗前后相比，差异有统计学意义（t=13.536～25.235，P
3 讨论
多种细胞信号途径、应激状态可以引起细胞凋亡。近年来，内质网作为线粒体凋亡途径的调节器越来越受到重视[7]。作为内质网应激标志物的分子伴侣GRP78在内质网发生应激时表达上调[8]。内质网对氧化应激十分敏感[9]。人们还发现，内质网和线粒体位置很密切，可以通过分子弥散影响彼此的功能。内质网损伤和线粒体细胞色素C的释放可能存在关联性。本文结果显示，体外培养的大鼠皮质神经元在缺血6 h再灌注24、48 h后，GRP78免疫活性明显增加，提示神经元发生了内质网应激，各实验组神经元凋亡发生率均显著高于对照组。为了探讨培养神经元凋亡发生的机制，本文分别应用FCM、Western blot检测活性Caspase3、Caspase9、Caspase8、Caspase12的表达，实验结果显示，实验组Caspase12活性在再灌注24 h明显增强，而到了48 h则有所降低。提示Caspase12在内质网应激凋亡早期起到很大作用。神经元缺血再灌注后活性Caspase3、Caspase9以及Caspase8均明显增加，说明Caspase3、Caspase8、Caspase9、Caspase12均参与了缺血再灌注后的神经元凋亡。细胞凋亡是复杂的过程，线粒体途径、死亡受体途径、内质网应激等细胞器途径之间存在着复杂的相互联系。
表2 丹红注射液治疗前后各种Caspase表达比较（略）
与缺血再灌注组比较，*t=8.374～22.107，P
表3 丹红注射液治疗24 h免疫印迹分析结果（略）
与缺血再灌注组比较，*t=13.536、18.936，P
表4 丹红注射液治疗48 h免疫印迹分析结果（略）
与缺血再灌注组比较，*t=13.76、25.235，P
Bcl2蛋白家族，包括 Bcl2、 Bclx、Bad等，对凋亡起着重要的调节作用[10]。促凋亡因子Bax 和Bak通过促进线粒体释放细胞色素C而促进凋亡，Bcl2作用正相反。最近有证据表明，Bax 、 Bak和Bcl2也定位于内质网，并被内质网应激激活[11]。本实验显示，在内质网应激时，Bcl2免疫活性降低，细胞色素C表达增加。可能在细胞遭受应激反应时，内质网应激激活的相关Caspase是凋亡的早期事件，随后导致线粒体外膜通透性增加，细胞色素C释放到胞浆，进而促进凋亡复合体的形成，激活效应Caspase，引起凋亡。但体外培养大鼠皮质神经元凋亡中各途径之间的联系还有待进一步研究。
丹红注射液由中药红花和丹参科学提取精制而成，主要成分为红花黄色素、丹参酮和丹参酚等。丹参可扩张脑动脉，降低血管阻力，降低血液黏度，增强红细胞变形能力，并能清除氧自由基，拮抗Ca2+内流，改善ATP酶活性， 同时也可提高脑组织耐低氧能力， 对脑组织具有明显的保护作用。红花具有活血通络、祛瘀止痛的作用，红花提取物在体内、体外均能明显抑制血小板聚集，对内源性凝血系统的激活有一定的抑制作用，有增加脑动脉血流量及营养脑细胞的作用[12]。给予体外培养的大鼠皮质神经元8 mL/L丹红注射液作用24、48 h后，细胞活力明显高于对照组，而80 mL/L浓度组细胞活力显著低于对照组。说明适当浓度丹红注射液对神经元存活有促进作用。丹红注射液是中药制剂，高浓度时可能存在细胞毒性，反而抑制细胞活性，具体机制尚需进一步研究。本文结果显示，丹红注射液作用于缺血再灌注损伤神经元24、48 h，细胞凋亡率明显减少，同时Bcl2免疫活性增强，细胞色素C表达减少，活性Caspase3、Caspase8、Caspase9表达均显著下降。但免疫印迹分析显示，GRP78及活性Caspase12的表达与对照组比较无显著差异。因此，我们认为丹红注射液对体外培养大鼠皮质神经元凋亡有抑制作用，其作用可能是通过上调Bcl2、抑制细胞色素C表达而实现的。
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血液的化学元素范文第6篇
【关键词】 应激
【摘要】 目的 观察束缚应激后小鼠全血中铁、锌、钙和镁含量的变化，研究束缚应激对全血4种元素的影响和规律。方法 建立小鼠束缚应激模型，原子吸收分光光度法测定小鼠全血中铁、锌、钙和镁的含量。结果 对照组小鼠全血铁、锌、钙、镁含量分别为（39120±1601），（590±056），（5944±1071），（4512±338）μg/ml；实验组小鼠全血铁、锌、钙、镁含量分别为（35123±3522），（505±070），（5968±740），（4399±431）μg/ml。与对照组比较，接受应激的小鼠全血中铁、锌含量显著降低（p＜005），钙含量略有升高，镁含量降低，但差异均无统计学意义（p＞005）。结论 束缚应激可使小鼠全血铁、锌含量显著降低；微量元素铁、锌与束缚应激反应之间存在一定的联系。 【关键词】 应激
应激是机体对各种外界应激原作用的反应，适度的应激是机体保护机制的一部分，有益于健康。但过度的应激往往成为疾病的诱因〔1〕。研究证实，应激能够影响动物和人体的免疫功能〔2，3〕。机体免疫系统功能的紊乱又是感染性疾病、肿瘤等发生或恶化的直接原因〔4，5〕。wWW.133229.CoM实验研究表明，应激可引起机体细胞因子、蛋白、酶等的变化〔6，7〕，而有关应激与元素之间关系的研究较少。铁、锌、钙和镁是人体中的必需元素，在人体生理生化过程中起着重要作用。因此，研究应激与元素之间的关系有重要意义。原子吸收光谱法具有灵敏度高、选择性好、精密度高、分析速度快等优点。本文采用原子吸收光谱法测定了束缚应激后小鼠全血中铁、锌、钙和镁4种元素的含量，旨在探讨束缚应激对全血中元素的影响。
1 材料与方法
11 动物与分组 选用32只健康c57bl/6纯系小鼠，体重20～25g，雌雄兼用，随机分为对照组和束缚组，每组16只。
12 应激模型的制备 应激模型的制备按文献［8］进行。将小鼠装入带有通气孔的可以限制其各个方向的束缚器中，室温下维持12h。正常对照组小鼠留置原饲养笼中正常饲养。实验期间2组小鼠均禁食禁水。
13 标本采集 解除束缚后恢复2h，摘除眼球采血，肝素抗凝。
14 全血元素含量测定
141 样品处理 取肝素抗凝血05ml用去离子水稀释定容,测定铁、钙、镁稀释100倍，锌稀释30倍。
142 标准溶液的配制 铁、钙、锌的工作液（100μg/ml）及镁的工作液（50μg/ml）分别由1mg/ml的铁、镁、钙、锌储备液稀释而成。用工作液稀释成不同浓度的标准溶液。标准溶液系列：铁标准溶液为10，20，30，40，60μg/ml；钙标准溶液为01，02，04，08，12μg/ml；锌标准溶液为005，01，02，03，04μg/ml；镁标准溶液为005，01，02，03，04μg/ml。
143 元素测定 用aa370mc原子吸收分光光度计测定样品中4种元素的含量，优化后的仪器工作条件为空气流量：7l/min；乙炔流量：17l/min；灯电流：铁和锌为6ma，钙和镁为4ma；狭缝宽度：铁为02mm,锌、钙和镁为07mm；波长：铁为2483nm,锌为2139nm,钙为4227nm,镁为2852nm。对标准溶液进行测定，绘制标准曲线，各元素线性关系良好。各元素回归方程为铁：c=1383a-04848；锌：c=5815a-002241；钙：c=1613a+001452；镁：c=1038a-002035。相关系数铁：09942；锌：09979；钙：09994；镁：09996。
15 统计分析 应用spss 100 统计软件进行分析，测得数据经spssexplore去除奇异值后得到有效数据（即分组时各组均为16只，去奇异值后有的少于16只）采用独立样本t检验分析2组差异，检验水平为p＜005。
2 结果
21 小鼠全血铁含量测定 应激后16只小鼠全血中铁含量为(35123±3522)μg/ml，与对照组〔15只小鼠结果为(39120±1601)μg/ml〕比较，显著降低，差异有统计学意义(p＜005)。
22 小鼠全血锌含量测定 应激后16只小鼠全血中锌含量为(505±070)μg/ml，与对照组〔15只小鼠结果为(590±056)μg/ml〕比较，显著降低，差异有统计学意义(p＜005)。
23 小鼠全血钙含量测定 应激后16只小鼠全血中钙含量为(5968±740)μg/ml，与对照组〔16只小鼠结果为(5944±107)μg/ml〕比较，钙含量略微升高，差异无统计学意义(p＞005)。
24 小鼠全血镁含量测定 应激后小鼠15只全血中镁含量(4399±431)μg/ml，与对照组〔15只小鼠结果为(4512±388)μg/ml〕比较，镁含量降低，差异无统计学意义(p＞005)。
25 实验组元素间相关分析 采用pearson进行相关分析。元素间相关性分析结果表明，相关性fe-zn,fe-ca,fe-mg,zn-ca,zn-mg,ca-mg的r值分别为0877，0135，0770，0073，0493，0388；p值分别为0000，0617，0001，0788，0062，0153。
3 讨论
钙、镁都参与水盐代谢，对维持内环境的稳定有重要作用。应激可能通过影响这些元素的代谢，重新维持内环境的平衡〔9〕，这可能是本文中引起钙镁变化的原因。铁主要用于合成血红蛋白，构成各种金属酶的必需成分或活化某些金属酶和它的辅助因子，在机体运送氧和细胞内电子传递中发挥极其重要的作用。在应激条件下，肌肉处于紧张的运动，代谢率增加，耗氧量随之增加〔10〕，而运载氧及氧化磷酸化和三磷酸腺苷(atp)的生成均需要大量铁的参与，这可能是血中铁水平下降的原因。锌是多种酶的组成成分，在激素的产生、储存和分泌中起着重要作用。有研究表明，锌有应激保护作用。其应激保护机制可能与其参与构成机体抗氧化防御系统有关。锌可能通过提高机体抗氧化能力来实现其应激保护作用〔11〕。有研究表明，应激会引起体内锌的损耗〔12〕。应激小鼠血中锌下降可能是因为应激机体对锌的需求量增加，血中锌转移到发挥其生理作用的靶器官。对4种元素进行相关性分析，发现铁与镁、铁与锌有显著的相关性，可能应激对铁与镁及对铁与锌的影响机制相同。综上分析，微量元素铁、锌在应激中有着重要作用，其具体机制有待进一步探讨。
【参考文献】
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血液的化学元素范文第7篇
【摘要】 目的 研究异黄酮苷元滴丸和片剂的药动学及相对生物利用度。方法 以SD大鼠为实验动物，采用高效液相色谱法测定异黄酮苷元滴丸和片剂单剂量灌胃给药后大鼠的血药浓度变化。用3P97软件进行药代动力学数据处理，计算分析药代动力学参数和相对生物利用度。结果 异黄酮苷元滴丸：AUC为46.30 μg·min·mL-1，cmax为0.89 μg·mL-1，tmax为18.03 min;片剂：AUC为36.01 μg·min·mL-1，cmax为0.41 μg·mL-1，tmax为31.43 min，滴丸相对于片剂的相对生物利用度为128%。结论 异黄酮苷元滴丸、片剂均符合一室模型，滴丸较片剂具有较高的生物利用度。本研究为异黄酮苷元滴丸研制提供了一定的依据。
【关键词】 异黄酮苷元滴丸;异黄酮苷元片剂;高效液相色谱法;药代动力学;相对生物利用度
Abstract:Objective To investigate the pharmacokinetic and relative bioavailability of isoflavone aglycone dripping pills and tablets in healthy SD Rats，and evaluate the pharmacokinetic effects of the two dosage forms of isoflavone aglycone. Methods 36 SD rats were intragastrically administered with the suspension solution of isoflavone aglycone dripping pills and tablets at single dose，and changes in plasma concentration were determined by HPLC. Pharmacokinetic data were processed with 3P97 software and the pharmacokinetic parameters and relative bioavailability were calculated. Results For dripping pills of isoflavone aglycone:AUC=46.30 μg·min·mL-1，Cmax=0.89 μg·mL-1，Tmax=18.03 min; and for tablets of isoflavone aglycone:AUC=36.01 μg·min·mL-1，Cmax=0.41 μg·mL-1，Tmax=31.43 min. The relative bioavailability of dripping pills and tablets was 128%. Conclusion The pharmacokinetics of dripping pills and tablets of aglycone isoflavone were in accordance with single compartment model，and the relative bioavailability of dripping pills of aglycone isoflavone was higher.
Key words:isoflavone aglycone drippping pills; isoflavone aglycone tablets; HPLC; pharmacokinetics; relative bioavailability
异黄酮苷元(isoflavone aglycone)是一种来源于豆类植物的游离苷元，包括染料木素、黄豆苷元、黄豆黄素3种活性成分，其中染料木素的结构与雌二醇相似，且含量最高，生物活性最强[1]。异黄酮苷元是一种具有较强的抗氧化活性和神经保护作用的植物雌激素，在防治老年性痴呆和由于雌激素缺乏导致的骨质疏松等方面有良好的应用前景[2]。但异黄酮苷元难溶于水，生物利用度低，影响了其在体内的生物活性。本实验通过考察自制异黄酮苷元滴丸[3]和片剂[4，5]的药代动力学特征，为异黄酮苷元滴丸的临床应用提供依据。
广东药学院学报 第25卷 第6期 杨红，等.异黄酮苷元滴丸和片剂在大鼠体内的相对生物利用度研究
1 材料与仪器
1.1 材料
异黄酮苷元滴丸和片剂是由本实验室从大豆中提取制备的游离苷元研制而成(平均丸重25.03 mg·丸-1，染料木素含量为133.2 mg·g-1;平均片重453.84 mg·片-1，染料木素含量为5.40 mg·g-1);染料木素对照品(上海同田生化技术有限公司);无水甲醇(分析纯，天津市科密欧化学试剂有限公司);磷酸(分析纯，沈阳经济技术开发区试剂厂);甲醇(色谱纯，TEDIA公司);异黄酮苷元滴丸灌胃液(精确称取0.05 g滴丸细粉，0.5%羧甲基纤维素钠定容到100 mL，得到含染料木素66.6 μg·mL-1的灌胃液);异黄酮苷元片剂灌胃液(精确称取1.234 g片剂细粉，0.5%羧甲基纤维素钠定容到100 mL，得到含染料木素66.6 μg·mL-1的灌胃液);其余试剂均为分析纯。
1.2 动物
SD大鼠36只，鼠龄8～12周，体质量(200±10)g，广州中医药大学实验动物中心，许可证号：SCXK(粤)20080020，粤监证字2008A002。
1.3 仪器
P680A高效液相色谱仪(美国戴安公司);RE52CS旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);低SH2D循环水试真空泵(巩义市予华仪器有限责任公司);数显恒温水浴锅(江苏省宏华仪器厂);XW80型旋涡混合器(上海第一医学院仪器厂);高速离心机(日本日立公司)。
2 实验方法
2.1 对照品溶液的制备
取空白血浆6份，分别精密加入染料木素对照品制得质量浓度分别为0.05、0.10、0.20、0.40、0.80、1.60 μg·mL-1的对照品溶液，4 ℃保存备用。
2.2 色谱条件
参照文献[6，7]进行改进：色谱柱为Diamonsil C18色谱柱 (250 mm×4.6 mm，5 μm);柱温为25 ℃;流动相为甲醇0.3%磷酸溶液(体积比48∶52);流速为0.7 mL·min-1;测定波长为254 nm;进样量为20 μL。
2.3 血浆样品预处理
取血浆1 mL， 加入1 mL乙酸乙酯， 涡旋振荡
2 min，3 000 r·min-1离心5 min，移取上层有机相于另一试管中;将下层溶液重复上述步骤，合并有机相溶液，通风橱中挥干，残留物加无水甲醇溶解，0.45 μm微孔滤膜过滤，用无水甲醇定容于2 mL容量瓶，得血浆样品溶液。
2.4 方法专属性
在“2.2”项色谱条件下，测得空白血浆、对照品血浆(含染料木素)、样品血浆(含异黄酮苷元)的色谱图见图1。从图1可见，血浆中的杂质不干扰测定。
2.5 标准曲线[8]
取“2.1”项下的对照品溶液，按“2.3”项下处理并进样测定，以染料木素溶液的质量浓度为横坐标，相对应的染料木素的峰面积为纵坐标，用最小二乘法进行线性回归计算，得回归方程为y=3272.06 x-1.87，r=0.999 9。表明染料木素对照品的质量浓度在0.05～1.60 μg·mL-1(n=6)范围内与峰面积呈良好的线性关系。
2.6 精密度试验
取空白血浆1.0 mL，按“2.3”项下处理，制得高、中、低3种浓度(1.60、0.80、0.40 μg·mL-1)的样品溶液，分别于1 d内和3 d内连续进样5次测定，并计算RSD值，结果见表1。表1 精密度试验结果
2.7 相对回收率试验
精密吸取血浆样品3份，按“2.3”项下操作处理，得血浆样品溶液并根据标准曲线计算样品溶液浓度，将所得浓度与实际浓度的比值即相对回收率，见表2。表2 相对回收率结果
2.8 稳定性考察
取“2.1”项下的3种浓度(1.60、0.80、0.40 μg·mL-1)的溶液，分别于0、2、4、6、8、12 h进样分析，结果显示溶液中染料木素的RSD为0.83%，表明样品溶液在4 ℃避光条件下12 h内稳定。
2.9 血浆样品测定
取SD大鼠36只，随机分成2组，隔夜禁食，分别灌胃给予异黄酮苷元滴丸灌胃液或异黄酮苷元片剂灌胃液(2 mL·只-1)，于灌胃后0、5、10、15、30、45、60、75、90、105、120、150 min对大鼠进行眼眶取血(约1.5 mL·只-1)， 置肝素试管中抗凝， 5 000
r·min-1离心5 min，分离上清液，得血浆样品。按“2.3”项下方法处理得到血浆样品溶液并进行测定，利用回归方程求出血药浓度。
3 结 果
3.1 血药浓度测定结果
按不同时间点求出平均血药浓度，并绘制血药浓度-时间曲线，见图2、3。由图可见：15 min时滴丸的血药浓度为0.706 μg·mL-1，片剂的血药浓度为0.405 μg·mL-1，相比其他时间点，此采血点的血药浓度最高。
3.2 药动学参数
血药浓度数据经药代动力学软件3P87拟合处理后，药动学参数结果见表3。从表3可见：异黄酮苷元滴丸和片剂均符合一室模型;滴丸和片剂的主要药代动力学参数具有明显的差别，滴丸在18.03 min时达到血药浓度峰值0.89 μg·mL-1，而片剂出现2个峰值，分别在15 min和75 min，血药浓度峰值为0.41 μg·mL-1和0.365 μg·mL-1;滴丸的AUC为46.30 μg·min·mL-1，而片剂的为36.01 μg·min·mL-1，滴丸的相对生物利用度约为片剂的128%。表3 异黄酮苷元滴丸和片剂药代动力学参数
4 讨 论
异黄酮苷元具有苯并吡喃酮结构，有较强的紫外吸收，3种活性成分均难溶于水[9]，影响了其在体内的吸收利用。本实验对自制异黄酮苷元滴丸和片剂的药代动力学特征和生物利用度考察，结果显示滴丸的血浆药物浓度-时间曲线为单峰，而片剂表现为双峰，说明片剂可能在大鼠体内存在肝肠循环;异黄酮苷元滴丸生物利用度为片剂的1.28倍，说明滴丸可显著改善和提高异黄酮苷元在体内吸收和代谢，在一定程度上解决了异黄酮苷元难溶于水，生物利用度低的问题。本文结果为进一步的体内研究提供了依据。
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血液的化学元素范文第8篇
在营养化学中，食品按其所含微量元素成分可分为碱性、中性和酸性食品三大类。含钾、钠、钙、镁等微量元素成分较多的食品为碱性食品；含磷、氯、硫、碘等微量元素成分较多的食品为酸性食品。食品的酸碱性是指食品消化后，使人体体液(如血液、其他组织液)倾向于酸性或碱性的趋势，不是指食品本身汁液的酸碱性。食品中的营养成分中，像糖类、蛋白质、脂肪等有机成分，经人体代谢后，部分变为人体的组织成分，部分则变为CO2、NH3等排出体外，真正进入血液影响pH的是食品中的微量元素(或矿物质)。
我们在日常饮食中所吃的食物，如海带、菠菜、西瓜、萝卜、香蕉、梨、苹果、胡萝卜、草莓、莴苣、黄瓜、洋葱、藕、红薯、大豆等蔬菜、水果类、茶叶、牛奶等，含有较多的金属元素，如钙、钾、钠、铁、镁、锌等，经身体吸收代谢后生成带阳离子的碱性氧化物，可缓冲酸性代谢物，故称为碱性食品，而粮食谷类、禽畜、肉类、蛋类、鱼类、还有白糖、甜食、白酒、啤酒等含磷、硫、氯等酸性元素较多，在体内经消化和代谢，其最终产物呈酸性，故称为酸性食品。
100g干燥食品灼烧后所得的灰分(食品中矿物质经灼烧生成固态氧化物)，调制成水溶液，用0.1mol/L的HCl或NaOH溶液中和，其消耗的HCl或NaOH溶液的毫升数被用作食品的酸度和碱度指标。
血液的化学元素范文第9篇
一、食物的酸碱性
在正常状态下，人类的血液和体液都稍偏碱性，pH值保持在7.35～7.45之间，此时人体健康状态最佳。而如何达到酸碱平衡呢，首先要从食物的酸碱性说起，食物的酸碱性是由食物经人体消化、吸收、代谢后的产物所决定的。
1、“成酸食物”：一般来说含氟、氯、硫、磷等非金属元素较多的食物，称为“成酸食物”。例如：肉禽类、蛋类、鱼类、粮食、油脂、花生、白糖、啤酒等。这些食品中的硫、磷含量高，在人体内代谢后形成硫酸、磷酸，使体液的酸度升高。
2、“成碱食物”：含钾、钠、钙、镁等金属元素较多的食物，称为“成碱食物”。例如：蔬菜类(冬瓜、番茄、南瓜、黄瓜、萝卜、菠菜、白菜、卷心菜、油菜、芹菜、莲藕、洋葱、茄子、马铃薯)、水果类(苹果、梨子、香焦、桃子、草莓、梅子、李子、柿子、葡萄、柑橘、柚子、柠檬)、豆及豆制品(豆腐、豌豆、大豆、绿豆)、蘑菇、竹笋、栗子、茶叶、咖啡、葡萄酒等，特别是海藻类如海带、紫菜等，所含矿物质远远高于蔬菜水果，红薯是强碱性食物。这些食物中的有机酸参与体内代谢，在人体内氧化后，(三羧酸循环)会产生氧气、二氧化碳和水排出体外，剩下的金属离子能使体液的碱度升高。
3、“中性食物”：食物所含的金属元素与非金属元素基本均衡，进入人体后代谢产物的酸碱性基本平衡，称为“中性食物”。例如：牛奶、芦笋等。
二、食物酸碱性直接影响人体健康
健康人的血液是弱碱性(微弱到近乎中性)，pH值维持在7.35～7.45左右，仅相差0.1个单位，因为这一pH值范围最适合于细胞代谢及整个机体的生存，当pH值小于7.3或大于7.5时均为出现酸中毒或碱中毒现象。
例：节日期间食荤菜过多，导致酸性元素过剩，使血液酸性化，血液就会色泽加深，黏度增大，甚至发黑而且混浊；血液中儿茶酚胺含量增高，使交感神经兴奋性增高，人会变得过于敏感，引起焦躁、慢性疲劳、便秘、皮肤粗糙、手足发凉、易感冒、伤口不宜愈合、对疾病抵抗力降低等，久而久之，影响大脑和神经功能，引起记忆力减退，思维能力下降，甚至造成神经衰弱，还会出现缺钙；儿童容易导致发育不良、食欲不振、佝偻病、皮肤病、胃酸过多、龋齿、便秘等；中老年人容易导致神经痛、血压增高、动脉硬化、脑溢血、胃溃疡等。酸性体质会使细胞的新陈代谢减弱，身体的抵抗力降低而易发生各种疾病，使皮肤变得粗糙、多皱纹、色素沉淀甚至脸色变得青黑。据统计，人类的疾病70 ％发生于酸性体质。
若是只进食或较多地进食蔬菜、水果等类碱性食品的人，也会导致碱性元素过剩，血液酸碱度偏离而影响健康，须知动物性食物是优质蛋白质、脂溶性维生素和非金属无机元素的良好来源，不摄入动物脂肪，将使人体对脂溶性维生素，如维生素A、P、E的摄取大受影响，亦会导致营养不足，甚至使细胞脆性增加，则血管壁也会因脆弱而易于破裂，特别是大脑内小血管出血，造成脑卒中；另外人体脂质过氧化反应加重，血管亦会易于硬化，甚至诱发胆结石。
科学研究表明一但pH值改变0.4个单位，就会有生命危险。
血液的化学元素范文第10篇
采用问卷调查、查阅病历及与主管医师、患者家属沟通等方法采集信息。主要涉及患者一般特征信息（年龄、性别、民族、身高、体质量）、临床特征信息（原发疾病、透析龄、透析频率、每周透析时间、透析方式、透析充分性等），并发症和治疗现状（肾性骨病、继发性甲状旁腺功能亢进、肾性贫血等）及血透医疗保障模式、次均血透自付医疗费用、肾病药品报销比例、家庭人均年度收入、医疗开销对家庭经济的影响状况等。1．2．2质量控制为确保研究的准确真实，培训固定4名肾脏专科医师到贵阳市12个血液透析中心收集资料；在调查过程中，对于调查表进行随机抽查的回访复查，并核实原始资料的完整性和准确性，填补缺漏项、纠正错误记录。建立Excel表，将采集信息双人独立录入，结果经逻辑差错和一致性分析。
采用SPSS13．0软件进行统计学分析。计量资料以x±s表示，用F检验进行显著性检验；计数资料用实际例数或构成比表示，用χ2检验进行显著性检验分析；以P＜0．05为差异有统计学意义。
2011～2012年贵阳市12个血液透析中心有血液透析病例1019例。符合纳入标准患者共887例，其中83例患者拒绝参加研究，48例患者因有20％的问卷内容未完成，故剔除。实际有效问卷756例（85．23％），其中男447例，女309例，平均（49．14±14．70）岁，患者平均透析龄为（48．21±19．45）个月。
ESRD患者月平均总医疗费用为（6072．55±3381．01）元。患者家庭人均年度收入以3～＜5万元为主，占58．07％，年度人均收入小于1万者占1．53％，年度人均收入1～＜3万者占16．25％，年度人均收入5～＜20万者占21．64％，而年度人均收入在20万或以上者为2．51％；通过问卷调查有64．8％的患者主观认为血液透析及药物治疗自付医疗费用对家庭经济生活水平有较大影响。仅有11．5％的患者主观认为影响极小。根据门诊大病医疗报销比例不同分，患者可分为4组：（1）市级社会医疗保险组（简称市保组），其实际血液透析次均费用自付10元，与肾病相关的治疗药品根据不同企事业报销比例略有不同，平均约按85％报销；（2）省级社会保险组（简称省保组），省级医疗保险（含公费报销）的患者实际血液透析次均费用自付20元，与肾病相关的治疗药品按90％～95％报销；（3）新农村合作医疗组（简称农保组），农保组患者实际血液透析次均费用自付金额达到近200元，与肾病相关的药品按40％报销；（4）其他形式医疗保险及自费患者组（简称自费组），无医疗保障的患者实际血液透析次均费用金额在385～565元，所有药物全自费。各种保险模式以市级医疗保障占主导，为72．75％，全自费患者仅占2．92％。4组患者的年龄、性别差异无统计学意义（P＞0．05），见表1。
4组患者接受血液透析的处置特征（透析龄、每周透析频次、每周血液透析时间、每周血液滤过时间、每周血液灌流时间）有一定差异。农合组和自费组患者的透析龄和每周血液灌流时间均显著低于市保组、省保组（P＜0．05）；自费组患者每周的透析次数及每周血液透析时间和每周血液滤过时间显著低于其他3组（P＜0．05），见表2。农合组、自费组的血红蛋白、每周EPO用量、血清铁蛋白、转铁蛋白饱和度均显著的低于市保组、省保组（P＜0．05），自费组反应血液透析充分性的Kt／V值、尿素清除率均显著的低于市保组、省保组及农合组（P＜0．05），省保组的甲状旁腺素水平显著低于市保组、农合组及自费组组（P＜0．05），见表3。
血液透析治疗是ESRD患者赖以生存的主要治疗手段之一，这也是一种非常成功的肾脏替代治疗［6－8］。随着血液净化理论和技术的日益成熟，接受血液透析的ESRD患者长期存活成为可能，但经济负担已成为影响透析患者长期存活的重要因素［9］。除血液透析费用外，血液透析患者经济负担还包括并发症治疗费、检验费、住院费及非医疗费（如营养费、交通费、陪护费等）。本研究发现，贵阳市ESRD患者家庭人均年度收入以3～5万元为主，占58．07％。有64．8％的患者主观认为血液透析对家庭经济生活水平产生较大影响，仅有11．5％的患者认为影响极小。既往研究显示，长期血液透析患者所需的经济费用大［10］，部分家庭难以支撑，自费患者常因经济负担过重，一般只能维持透析2～3年，因经济原因得不到充分透析或放弃治疗而过早死亡的比例显著高于有医疗保障患者［11］。近年来，虽然各种基本医疗保险制度和新型农村合作医疗制度的推进为透析患者提供了必要的经济支持，但仍然有部分患者不能享受基本医疗保险，而且不同模式的医疗保险对患者医疗经济负担的缓解作用也不尽相同。
本研究数据显示，2010～2011年有4．49％的自费患者接受血液透析，该组患者每周的透析次数以及血液透析、血液滤过治疗时间均显著低于其他3组，农保组、自费组患者每周血液灌流时间显著低于市保组、省保组。血液滤过、血液灌流虽价格较贵，但因透析原理不尽相同，能有效补充清除中大分子物质和毒素。目前已有多篇文献报道［12－13］，对于维持血液透析患者采用多种血液净化模式交替透析，将对患者的透析充分性及中、大分子尿毒症毒素的清除、并发症的防止更有效。而自费组患者因经济原因导致接受各种透析模式的次数和时间均低于其他有医疗保障组，这也是该组各项并发症、透析充分性均不达标的重要原因。研究还发现，农保组、自费组的血红蛋白、每周EPO用量、血清铁蛋白、转铁蛋白饱和度均显著的低于市保组、省保组，这很可能与农保组、自费组在血液透析次均费用、药品等因报销比例偏低需要个人自付的经济比例过高，经济负担较重，从而导致这两组患者难以长期坚持足量使用促红素、铁剂等药物以及透析充分性不足等有密切关系。在自费组血液透析充分性Kt／V值、尿素清除率均显著的低于有医疗保障的3组，究其原因与经济负担过重，导致每周透析频次、透析时间均较其他3组低有关。省保组的甲状旁腺素达标情况显著优于其他3组，这可能与该组药品报销比例最高，有足够的经济来化验检查以及使用改善甲状旁腺亢进的药物相关。综上说明了经济负担仍然是贵阳市ESRD患者血液透析质量重要的影响因素。
血液的化学元素范文第11篇
关键词：葛根素 血管性痴呆 皮层神经元
中图分类号：R285 文献标识码：A 文章编号：1674-098X（2014）02（a）-0221-02
血管性痴呆（vascular dementia，VD）是继阿尔茨海默病之后第二位最常见的痴呆症，是指大脑功能衰退，特别是与智能有关的功能全面衰退，致其发生的主要原因是脑血流量减少，引起脑组织生化代谢障碍[1]。葛根素（Puerarin，Pur）化学名为4，7一二羟基-8-D葡萄糖基异黄酮，近年来被广泛用于心脑血管疾病等急性期的治疗，包括心绞痛、心肌梗塞，心律失常、脑缺血等[2]。本实验从行为学、形态学角度，观察葛根素注射液对血管性痴呆小鼠皮层、海马神经元的保护作用。
1 材料和方法
1.1 血管性痴呆模型建立
成年昆明小鼠，18～22 g，雌雄不限，购自齐齐哈尔医学院动物研究中心。采用双侧颈总动脉持久性结扎法，并对该方法进行改良。用0.5%戊巴比妥钠麻醉并固定小鼠，钝性分离暴露右侧颈总动脉，结扎右侧颈总动脉，术后给予青霉素2万U/天，4d；于术后7 d进行第二次手术，同法结扎另一侧颈总动脉，腹腔注射青霉素2万U/天，4d，于二次手术后7 d采用跳台试验鉴别血管性痴呆动物模型是否成功建立。
1.2 动物分组
模型建立后小鼠随机分为（1）假手术组；（2）模型组；（3）葛根素组。各组立即给予相应药物。正常组和模型组：腹腔注射生理盐水，1次/日，注射14d。葛根素组：腹腔注射葛根素注射液（1 mg/mL），0.1 mL/10 g，1次/日，注射14d。
1.3 HE染色
在末次给药后1h后取材，各组小鼠脑组织在4%多聚甲醛固定液中固定12 h后，室温梯度酒精脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，常规切片，将组织附于用防脱剂处理过的载玻片上，60 ℃恒温烘箱烘片12 h，备用于HE染色。石蜡切片经二甲苯逐级脱蜡水化后，入苏木素染色液中10 min，盐酸酒精分化数秒后入伊红染色1 min，梯度酒精脱水，二甲苯透明，树脂封片。光镜下观察皮层、海马组织结构变化。
2 结果
2.1 行为学观察
本实验采用跳台试验鉴别血管性痴呆动物模型是否成功建立，跳台实验结果提示，模型组小鼠存在着明显的学习记忆障碍，模型建立成功。与模型组比较，葛根素注射液组小鼠的反应时间明显缩短，潜伏期显著延长，错误次数减少，改善了血管性痴呆小鼠学习记忆能力。
2.2 HE染色
光镜下，假手术组小鼠皮层、海马神经元染色清晰，排列规则整齐，形态完整，多呈锥形、星形，核大而圆，着色较浅，位于细胞中央，偶尔可见嗜酸性核仁。模型组皮层、海马神经细胞排列紊乱，数目减少，周围有三角形或扁圆形小胶质细胞和星形胶质细胞增生，染成红色，形态异常，许多细胞出现体积缩小，核浓染，出现核溶解、固缩、破裂等。葛根素注射液治疗组与模型组相比较，海马、皮层神经元细胞形态异常、损伤的情况明显减轻。见图1。
3 结语
建立理想的VD动物模型对于探明VD的发病机制，开发防治血管性痴呆的新药有着重要意义。双侧颈总动脉永久性结扎模型是血管性痴呆研究中常用的模型之一。传统方法因同时永久性结扎双侧颈总动脉，对动物打击过大，导致动物死亡率高，标本获取困难，实验周期延长。有文献报道报道，传统2VO法动物存活率仅为12.5%，本实验对传统方法进行改良，先后分次结扎双侧颈总动脉，分次结扎，有利于脑部血流重新分配，脑部血供重新建立，机体逐渐代偿适应。同时，更接近临床上常见的脑部慢性缺血的病理过程。实际观察也发现，改良模型组小鼠术后苏醒较快，死亡率也明显减少。
葛根素注射液是由从豆科植物野葛以及甘葛藤的干燥根中提取的有效成分而制成的注射液。临床应用，发现葛根素能明显降低脑梗死患者的梗死灶面积，降低急性脑梗死患者的血流变和提高神经功能学评分，明显改善红细胞变形能力，降低血液粘滞度，改善微循环，增加脑灌注，从而改善VD患者的认知功能[3]。许多脑结构都参与学习和记忆，无论是大脑皮层的不同区，还是海马，都不是独特的学习中枢或记忆中枢，对于不同模式的学习记忆过程发挥关键作用的脑结构不同。海马在简单空间定向和分辨学习与记忆中起着重要作用；前额叶皮层在复杂精细的时间、空间因素的综合学习和记忆过程中最为重要。本研究采用HE染色方法，在光镜下观察到VD模型小鼠皮层、海马区神经数目明显减少，排列紊乱，周围有三角形或扁圆形小胶质细胞和星形胶质细胞增生，染成红色，形态异常。提示永久性脑缺血VD模型小鼠皮层、海马区锥体细胞减少，而幸存的锥体细胞结构破坏不足以代偿其病理损伤而出现功能障碍，可能是其智能障碍的机制之一。葛根素注射液组小鼠跳台试验数据以及皮层、海马区锥体细胞的形态及损伤情况均得到了一定程度的改善，提示葛根素注射液对血管性痴呆小鼠的皮层、海马神经元存在一定的保护作用，但具体保护机制尚有待进一步研究。
参考文献
[1] 李梨，周岐新，石京山.血管性痴呆研究概况[J].中国老年学杂志，2005，25（10）：1269-1271.
血液的化学元素范文第12篇
【关键词】 儿童血铅微量元素营养干预
【中图分类号】R135.+1【文献标识码】 A 【文章编号】1005-0515(2010)005-021-03
铅是一种具有多脏器毒性的重金元素。儿童对铅的毒性作用极其敏感,我们在现实生活中广泛应用铅及其化合物,故日常发生儿童铅中毒的风险很高。儿童铅中毒并不表示临床意义上的中毒,而是表示体内的铅负荷已经影响到儿童的智能、生长发育和健康,大多数铅中毒的儿童并无贫血、腹绞痛和神经麻痹等中毒症状。近期的研究表明,血铅水平与儿童的心理发育和认知能力呈负相关,儿童血铅水平超过50μg/L即可出现神经行为问题和认知的缺陷。[1、2]所以,儿童铅中毒的防治工作开展的越早越好。
自2007年始,我院应用具有促进排铅和增强免疫力双重功效的力德希口服液对高铅血症儿童进行保健食品的营养干预。本研究以临床检测血铅水平≥100μg/L的儿童为研究对象,旨在观察服用力德希口服液、钙和维生素C等营养素,对儿童血铅和血钙、锌、铁、镁、铜含量水平的影响。
1 资料与方法
1.1 资料来源2007年10月～2010年02月间,在我院进行末梢血铅和微量元素(钙、锌、铁、镁、铜)检测的儿童中,血铅含量≥100μg/L,愿意接受观察和随访,且检测数据相对完整的患儿共计302例,年龄范围为1～14岁。
1.2 分组方法将血铅含量>100μg/L,未接受营养干预的儿童作为对照组,愿意接受营养干预的儿童根据家长意愿分为服用力德希口服液(北京爱富迪医药提供)的干预组和服用醋酸钙(昆明邦宇制药)和维生素C片(北京双鹤制药)的干预组进行疗效观察。力德希口服液干预组115例,男69例,女46例;醋酸钙和维生素C片干预组91例,男54例,女37例;对照组96例,男58例,女38例。各组儿童的性别分布基本相似,经统计学分析差异没有显著性(P>0.05)。
1.3 血铅和微量元素检测方法
我们应用北京博辉有限公司生产的 BH2100原子吸收光谱仪和BH5100型原子吸收光谱仪检测各项指标。采用指尖血80μg分二份分别进行血铅和血钙、锌、铁、镁、铜等微量元素的检测。血铅测定按照卫生部《血铅临床检验技术规范》标准进行质量控制,使用由国家质检总局批准的GBW[E]09003-090036标准物质作为指控物。
1.4 营养干预方式力德希口服液干预组:1-3岁,每天10毫升,口服;4-11岁,每天2次,每次10毫升口服;12岁以上,每天3次,每次10毫升口服。醋酸钙和维生素C片干预组:每天2次,每次醋酸钙和维生素C(100毫克)各1片,口服。按照医嘱连续干预1个月后停服半月,复查末梢血铅和微量元素含量,进行各组组间和干预前后的效果比对。
2 结果
2.1 儿童铅中毒对体内锌、铁、钙、镁、铜含量的影响
302名儿童干预前检测结果显示,儿童血铅浓度最低为100μg/L,最高为307μg/L,血铅浓度均数121.1±35.9μg/L,中位数为120.4μg/L。这些儿童中血锌缺乏(≤76.50μmol/L)122例,占被测人数40.40%;血铁缺乏(≤7.02mmol/L)118例,占被测人数39.07%;血钙缺乏(≤1.55mmol/L)57例,占被测人数18.87%;血铜缺乏(≤11.80μmol/L)6例,占被测人数2.0%;血镁缺乏(≤1.12mmol/L)1例,占被测人数0.33%。说明,血铅超标可引起体内其他有益元素含量的失衡,对所测元素影响大小为:Zn>Fe>Ca>Cu>Mg。其中缺锌、缺铁和缺钙的发生比例远远高于普通儿童。
2.2营养干预后血铅含量的变化
干预前各组儿童的平均血铅含量基本相似,经统计学分析差异没有显著性(P>0.05)。
经过一个月的营养干预后,对照组儿童的平均血铅含量稍有降低,但没有显著的统计学差异(P>0.05)。服用醋酸钙和维生素C片的干预组,平均血铅含量比干预前降低18.7μg/L,干预前后的血铅变化具有显著的统计学差异(P
表1营养干预前后儿童的平均血铅含量变化情况(t检验)
服用力德希口服液进行干预后,儿童的平均血铅含量明显降低,排铅效果明显优于服用醋酸钙和维生素C片,差异具有显著的统计学意义(P
2.3营养干预前后血锌、铁、钙、铜和镁的平均含量及其变化情况
干预前各组儿童的平均血锌、铁、钙、铜和镁的平均含量基本相似,经分析均没有显著的统计学差异(t检验,P>0.05)。见表2。
表2营养干预前儿童的血锌、铁、钙、
经过一个月的营养干预后,服用力德希口服液的干预组,平均血锌含量比干预前升高约12.48μmol/L,与干预前及其他两组比较均具有显著的统计学差异(t检验,P
表3营养干预后儿童的血锌、铁、钙、铜和镁的平均含量
3 讨论
近20多年来,国内外专家围绕儿童铅中毒的问题进行了大规模的流行病学调查和临床研究。业已证实,血铅在极低浓度时就能对儿童的智能发育、学习记忆能力和感觉功能产生不利影响。如长期过量地接触铅,不仅会阻碍儿童的体格生长,还可导致儿童大脑不可逆的损伤,有害效应是长期甚至是终身的。为此,世界卫生组织公告指出,铅在体内无任何生理功能,理想的血铅水平应为零。这就要求我们临床医生选择既可以降低血铅含量,又对儿童生长发育有益,且十分安全的营养干预手段,来积极服务大众。[2]
前期,钙和维生素C是一些专家对铅中毒儿童进行营养干预的重要手段,也有专家提出锌、硒和维生素B1具有良好的拮抗铅损伤效果。[3、4]我们选择国家食品药品监督管理局批准的具有促进排铅和增强免疫力双重功效的保健食品力德希口服液,在近几年的临床实践中取得了更好的效果。力德希口服液的主要成分包括、枸杞、土茯苓、葡萄糖酸锌和亚硒酸等,其中存在多种成分具有络合铅和抗铅损伤的作用。[5]
应用力德希口服液对铅暴露儿童进行营养干预的机制涉及多个方面。首先,富含巯基的氨基酸和亚硒酸对降低体内铅的浓度,减轻中毒症状有利。其次,丰富的生物黄酮、维生素、锌、硒、铁等对铅的毒性均有一定的拮抗作用,他们不仅可减少铅的吸收,缓减铅中毒症状,还可通过保护巯基酶参与解毒过程,促进铅的排出。再者,大分子的粗多糖成分,可以阻止铅吸收,增强机体免疫力。降低血铅水平的效果明显优于钙和维生素C的复合治疗手段,还具有纠正机体缺锌、缺铁的辅助效果。
儿童铅暴露的危险因素不同于职业性铅接触,较常见的因素是小环境铅存留通过饮食或接触引起的铅摄入,因此,在客观给定的环境中,保持良好的饮食和卫生习惯是减少儿童铅摄入的根本措施。一旦儿童过多暴露于铅环境,血铅含量升高,甚至出现某些铅中毒的临床或亚临床症状,应尽早进行排铅。
参考文献
1. Lanphear BP, Dietrich KN, Auinger P, Cox C. Cognitive deficits associated with blood lead levels
2. 傅松涛. 儿童铅中毒铅防治. 山西科学技术出版社(太原), 2003, 7: 109-126.
3. 刘亚华. 铅对锌的影响及补锌对铅暴露的作用[J].国外医学卫生学分册, 2003, 30(1): 40-44.
4. 丁筱林,付利民,等. 硒锌氨基酸对铅中毒儿童的治疗效果[J]广东微量元素科学, 2002, 9(8):39-41.
血液的化学元素范文第13篇
天麻属兰科植物，从天麻中提炼出的化学成分有天麻素、天麻苷元、香荚兰醇、香荚兰醛、天麻醚苷、对羟基苯甲醛、柠檬酸、琥珀酸等。其中活性成分含量最高的有效单体成分是天麻素（化学名为对羟甲基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷，又称天麻苷）［1］。本文对天麻素注射液的药理作用和临床应用综述如下。
1 天麻素的药理作用
1.1 镇静催眠作用实验猴采用静脉注射天麻素50 m g/kg，20 min后即出现安静、无紧张样，持续时间达2 h。给实验小鼠皮下注射天麻素的结果显示，天麻素明显有协同戊巴比妥钠、水合氯醛及硫喷妥钠等的作用。天麻素能对抗咖啡因所致的中枢兴奋作用和明显延长小鼠戊巴比妥钠催眠剂量的睡眠时间。恒河猴、兔及鸽静脉注射天麻素后均产生镇静作用。天麻素可透过血脑屏障，在脑组织中以较高速度降解为天麻苷元，天麻苷元为脑细胞膜Bz受体的配基。因此天麻苷元作用于γ氨基丁酸/Bz受体，从而显示镇静、抗惊厥的中枢抑制效应［2］。
1.2 抗惊厥作用小鼠腹腔注射天麻素30 mg/kg，30 min后静脉滴注0.5%戊四氮溶液30 mg/kg，结果显示天麻素能够延长戊四氮阵挛性惊厥的潜伏期，具有明显对抗戊四氮阵挛性惊厥的作用［3］。天麻素有延长马桑内脂致家兔癫痫发生的潜伏期，减轻大发作程度，缩短大发作时程，加快其恢复过程和降低死亡率的趋势［4］。
连亚军等［5］通过建立戊四氮（PTZ）点燃大鼠癫痫模型，观察托吡酯（TPM）及天麻素对大鼠行为、脑电图（EEG）及海马内生长相关蛋白-43（GAP-43）表达的影响。结果，TPM组和天麻素组大鼠EEG表现低波幅快波或棘波、棘慢波，但波幅明显降低，痫样放电显著减少。点燃组海马结构内GAP-43免疫反应产物的密度普遍较高，TPM组和天麻素组大鼠海马结构内GAP-43免疫反应产物的密度较低，免疫反应产物颗粒细小淡染，稀疏。表明托吡酯和天麻素有抗癫痫形成作用，并可抑制海马内GAP过度表达。
1.3 镇痛作用天麻连续给药，采用电击鼠尾法和扭体法，观察到天麻素有明显的镇痛效果，且镇痛作用与剂量相关［6］。
1.4 对脑细胞损伤的保护作用
1.4.1 拮抗兴奋性氨基酸的神经毒性对新生大鼠大脑皮层进行体外神经细胞培养，用谷氨酸建立离体神经元损害模型，观察天麻素对兴奋性氨基酸神经毒性的影响。结果表明［7］，200 μmol/L的谷氨酸作用10 min能造成培养神经元的大量死亡，培养液中乳酸脱氢酶（LDH）含量明显增高，在培养液中加入天麻素可明显降低神经细胞死亡率，减少乳酸脱氢酶的漏出。此结果提示天麻素可拮抗兴奋性氨基酸对神经细胞的毒性作用。检测人神经母细胞瘤SHSY5Y细胞系培育液中谷氨酸的含量，观察到天麻素有拮抗氯化钾诱导的钙离子内流，减少神经母细胞谷氨酸的释放［8］。
1.4.2 对缺血再灌注损伤的保护作用经过天麻素孵育后的神经细胞模拟缺血再灌注后，LDH的漏出及脂质过氧化物（LPO）的含量明显降低，膜流动性明显好于损伤对照组［9］。对缺血再灌注损伤星形胶质细胞的研究显示：天麻素可使胶原纤维酸性蛋白（GFAP）表达减轻，乳酸脱氢酶（LDH）漏出下降，一氧化氮合成酶（NOS）活性减弱。用谷氨酸和H2O2造成PC12细胞损伤模型，天麻素10-7，10-6，10-5mol/L可明显地提高谷氨酸诱导的PC12细胞还原MTT的能力，抑制LDH的释放，明显抑制细胞内Ca2+含量的升高，减轻H2O2引起的PC12细胞损伤，降低PC12细胞内过氧化氢的含量，剂量相关性地降低PC12细胞的凋亡百分率。此结果说明，天麻素有抑制氧自由基诱导的神经细胞损伤的作用。对天麻提取物抗氧化活性与其天麻素含量的相关性的研究结果表明，粗提物及20%EtOH洗脱液清除自由基活性最强，但天麻素含量最高的是60% EtOH洗脱液。这一研究结果提示，天麻抗氧化的主要成分不一定是天麻素［10］。
1.5 对循环系统的影响
1.5.1 降低外周血管阻力、降低血压和增加动脉血管顺应性的作用采用改良风箱模型计算动脉血管的顺应性和血流惯性，在静注天麻前后，记录和计算实验狗的血压、心输出量、外周血管阻力、血流惯性以及中央和外周动脉血管的顺应性。结果表明：天麻能明显增加实验狗动脉血管顺应性，有降低外周血管阻力和降低血压的作用［11］。
1.5.2 增加心脑血管血流量的作用采用Langendorff法对离体心脏灌流［12］，天麻液（1∶2000）可使冠状动脉血流量先减少后增加，最高血流量增加到181%。静脉注射天麻素注射液10～20 g/kg，以同位素铷86测定小鼠心肌血流量的结果是：小鼠心肌血流量显著增加。常压缺氧条件下，天麻注射液能提高小鼠对缺氧的耐受能力，明显延长死亡时间，降低小鼠在低压缺氧时的死亡率。天麻素注射液颈内静脉推注不仅可以增加兔脑血流量，而且能对抗肾上腺素的缩血管效应。天麻素注射液（1 g/kg）颈外静脉注射，可明显扩张麻醉大鼠肠系膜动脉管径，血流加快。
1.5.3 对心肌细胞的保护作用静注天麻素注射液，观察家兔急性心肌梗塞范围及脂质过氧化的影响［13］。结果显示，天麻素注射液能减少冠状动脉左室支结扎后心前区心电图标测的病理性Q波数目，降低丙二醛（MAD）水平，减小心肌梗塞面积。还有研究观察到，合成天麻素可使丝裂霉素（MMC）所致心肌细胞变性减轻，坏死减少。对体外培养乳鼠心脏搏动及心肌组织化学的研究表明［14］，合成天麻素可使心搏频率加快，心肌收缩力加强，而且心肌细胞内糖原、核糖核酸、脱氧核糖核酸、三磷酸腺苷酯、琥珀酸脱氢酶和乳酸脱氢酶显著增加，表明天麻素可能具有促进心肌细胞能量代谢的作用。
1.5.4 抑制炎症早期的渗出和阻止血栓形成的作用天麻素注射液（5 g/kg）可抑制醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增加，抑制二甲苯所致小鼠耳部血管通透性增加，以及前列腺素（PGE2）所致大鼠皮肤毛细血管通透性增加，说明天麻素对炎症早期渗出有抑制作用［15］。天麻素注射液对抗大鼠肾上腺素（AD）的缩血管效应，显示对微循环障碍有预防作用，阻止血栓形成。
1.6 增强免疫和抗遗忘抗衰老作用天麻素注射液能显著增强小鼠巨噬细胞吞噬功能和血清溶菌酶活力，显著增强小鼠的非特异性免疫作用和T细胞的免疫应答，促进特异性抗体形成。黄秀兰等［16］研究天麻素注射液对小鼠脾淋巴细胞转化的影响。观察到，低浓度的天麻素注射液（腹腔注射2.5～20 mg/kg，体外实验0.1～100μg/ml）具有提高小鼠脾淋巴细胞转化的功能。但中等浓度的天麻注射液（腹腔注射40 mg/kg，体外实验200～400μg/ml）对ConA剌激的小鼠脾淋巴细胞转化无明显作用，高浓度的天麻注射液（体外实验800μg/ml）则有抑制小鼠脾淋巴细胞转化的作用。
天麻素注射液可使大鼠血、肝、肾、海马、皮质多种组织中超氧化物歧化酶（SOD）、谷光甘肽过氧化物酶（GSH-PX）含量显著升高，说明天麻抗衰老与抗氧化酶作用有关［17］。
1.7 对噪声性耳蜗损伤防护作用唐旭霞等［18］对豚鼠噪声性耳蜗损伤的实验研究，测量ABR阈值、耳蜗基底膜铺片和电镜扫描观察到，天麻素能降低豚鼠噪声暴露后的听力脑干反应（ABR）阈值，减轻毛细胞损害，对噪声性耳蜗损伤有保护作用。
2 天麻素的药代动力学
天麻素的药代动力学研究表明：家兔、狗和大鼠静脉注射天麻素后体内药动学符合开放性双隔室模型。程刚等报道［19］，大鼠灌胃给药符合开放性单隔室一级吸收模型，以天麻素200 mg·kg-1灌胃给药后的生物利用度很高，达86.1%。天麻素静脉给药在大鼠体内分布迅速，代谢很快，给药20 min左右血药浓度即达到极低水平，经灌胃给药后，25 min左右达高峰，而后迅速衰减，表明天麻素在体内不易蓄积。健康人静注天麻素后，血药浓度-时间曲线附合二室模型的函数曲线［20］，与其在动物体内的药动学研究结果相一致。天麻素在体内分布以肾脏最高，而后依次为肝、血、脑及小肠，天麻素进入体内后在血液、肝脏、脑组织中以较高速度降解为天麻苷元，发挥药理效应［21］。用5%的天麻素注射液尾静脉注射和灌胃给药（剂量1250～5000 mg·kg-1），给药后观察3 d未见急性中毒或死亡，给小鼠连续60 d灌胃给药（剂量25～375 mg·kg-1），观察小鼠的食欲、活动、血细胞及受孕繁殖均无影响，对心、肝、肾、脾、肺作组织切片镜检，未见组织细胞异常变性，说明长期用药无明显毒性。可见天麻及其活性成分不仅有很高的药效价值，而且无明显毒副作用，为临床适应症的治疗提供了依据。
3 天麻素的临床应用
3.1 治疗眩晕和头痛天麻素注射液治疗椎-基底动脉供血不足眩晕的报道较多，经颅多普勒（TCD）观察到天麻素注射液能有效增加椎-基底动脉血供，改善迷路动脉及内耳血供。天麻素对于缓解眩晕症状的起效时间、治愈率、有效率明显好于丹参注射液、血塞通注射液［22，23］。 天麻素注射液改善梅尼埃病的眩晕症状效果显著［24］。 董玉娟等［25］应用天麻素注射液治疗前庭神经炎52例，与眩晕停组对照，症状改善的时间明显缩短，疗效肯定。张念祖等［26］应用天麻素注射液对120例周围性眩晕和80例神经性耳鸣的治疗效果验证，眩晕者总有效率93.3%，耳鸣者总有效率77.5%。天麻素注射液改善眩晕、平衡障碍的疗效与盐酸倍他司汀相当，改善头痛及其他植物神经功能障碍的疗效优于盐酸倍他司汀［27］。陈静等［28］采用多中心随机单盲对照试验设计的方法，评价天麻素注射液治疗眩晕的疗效及安全性，将240例眩晕住院患者分为治疗组（n=120），对照组（n=120），分别予天麻素注射液600 mg和盐酸倍他司汀注射液30 mg，静脉滴注，1次/d，疗程7 d。结果两组眩晕症状控制率分别为71.19%和54.17%，有效率分别为90.60%和77.50%，前庭功能控制率分别为62.26%和42.37%，有效率分别为81.13%和76.27%。不良反应发生率分别为8.33%和10.83%。统计分析表明，天麻素注射液与倍他司汀注射液均为治疗眩晕的有效药物，而且天麻素注射液治疗眩晕症状有效率和前庭功能下降的临床控制率优于倍他司汀，临床应用不良反应少，患者耐受性好。
应用天麻素治疗慢性偏头痛、血管紧张性头痛病例，能够显著减轻和缓解头痛症状，明显减少月发作次数［29］。治疗单硝酸异山梨酯所致老年冠心病患者头痛，口服天麻素胶囊100mg 3次/d，与口服布洛芬0.4，3次/d治疗1周后疗效比较，天麻素组总有效率为96.6%，布络芬组总有效率为36.6%。而且，天麻素组没有布络芬组的恶心、上腹痛等副作用［30］。
3.2 治疗耳聋、耳鸣李宁等［31］随机将150例突发性耳聋患者分为3组，每组50例：高压氧+天麻素组、单纯高压氧组、单纯天麻素组。结果治疗的总有效率分别为：96.0%，84.0%和62.0%。说明天麻素注射液增强了高压氧改善听力恢复方面的作用。张念祖［32］用天麻素注射液神经性耳鸣患者80例，总有效率达到77.5%。
3.3 治疗周围神经病变用天麻素注射液穴位注射治疗糖尿病合并周围神经病变患者52例，效果明显优于维生素B12、甲钴胺、丹参注射液［33］。张春宝等报道，天麻加前列腺素E治疗糖尿病周围神经病变，可明显提高运动神经传导速度和感觉神经传导速度［34］。
3.4 治疗神经衰弱126例神经衰弱患者随机分为两组，治疗组64例，予天麻素注射液600 mg，1次/d，静脉滴注；对照组62例，予多虑平25 mg，谷维素10 mg口服，3次/d，舒乐安定1 mg，口服1次/晚。结果，天麻素治疗神经衰弱的效果明显优于对照组［35］。
3.5 治疗癫痫
王加强等［36］选择正在服用抗癫痫西药但发作仍不能控制的患者15例，在不增加原服用药剂量的基础上加用天麻素300 mg/d，结果：15例患者中有6例发作次数减少或减轻，占40%；7例患者自评部分有效，2例无效。由此得出结论，天麻素作为治疗癫痫的一种辅助用药，可减轻发作程度和改善临床症状。
3.6 治疗中风后遗症王忠良等［37］
应用天麻素注射液治疗中风患者，对中风认知功能障碍的疗效进行评价，结果天麻素注射液治疗中风认知功能障碍有确切疗效，且优于尼莫地平组。有报道，天麻素注射液治疗小脑卒中对缓解头晕、恶心呕吐、眼球震颤有明显的效果［38］。多发性脑梗死痴呆病人经天麻素高氧液治疗4周后，与对照组比较可显著提高其日常生活能力［39］。
4 小结
基础研究和临床应用证明了天麻素的药理作用有：镇静、催眠、抗惊厥、镇痛作用，对缺血再灌注及脑细胞的损伤有保护作用，可以增加心脑血管血流量，降低外周血管阻力，增加动脉血管顺应性，还有增强免疫和抗遗忘抗衰老等作用。文献报道天麻素注射液治疗各种原因引起的眩晕、头痛、癫痫、神经衰弱以及缺血性心脑血管等疾病，其疗效肯定，安全性好。因此，为天麻素注射液临床应用的进一步研究和开发提供了依据。
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血液的化学元素范文第14篇
关键词：豌豆（Pisum sativum）；微量元素；原子吸收光谱法
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）18-4492-02
豌豆（Pisum sativum）别名胡豆、戎菽、回鹘豆、毕豆等。因其苗柔弱，弯弯曲曲，故名豌豆。豌豆嫩时呈青绿色，老时则是麻斑花色。豆苗柔弱，枝攀援缠绕，有须。叶像蒺藜叶，两片对生。三四月间开花，花呈淡紫色，豆荚长3.3 cm，果实圆润。豌豆具止下泄痢疾，除呕吐，治消渴功效，可调眼养身，益中平气，催乳汁。其汤可祛除邪毒心病，解除乳石毒发作，去除痈肿痘疮[1]。通过对豌豆中微量元素的测定，将为研究其药用价值提供借鉴和参考。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
豌豆样品购于江西省宜春市凤凰菜市场。
分析纯盐酸，购于国药试剂有限公司。Cu、Zn、Mn、Fe标准溶液，购于国家标准物质研究中心，去离子水自制。
1.2 仪器
TAS-990型原子吸收分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；FS1604型电子分析天平（上海精科公司生产）；箱式电阻炉（天津华北实验仪器有限公司）；AKRY-UP-1824型艾柯超纯水机（成都康宁实验专用纯水设备厂）。
1.3 方法
1.3.1 标准溶液的配制 按表1配制各标准溶液。
1.3.2 前处理 样品用自来水洗净泥沙等杂质后，用去离子水冲洗3～5次，常温下晾干，于105 ℃烘干至恒重，装入洁净容器中备用。准确称取一定量豌豆样品于洁净蒸发皿中，在电炉低温灼烧后，于400～550 ℃的箱式电炉中灰化，至无黑色碳粒，取灰化产物冷却至室温，加2 mol/L盐酸溶液溶解，洗净蒸发皿，合并溶解液和洗涤液，去离子水定容至100 mL，待测。
1.3.3 测定 采用原子吸收光谱法测定各元素，仪器条件见表2。按该条件分别测定空白、标准工作溶液和样品溶液。以吸光度A对浓度C（μg/mL）作一元线性回归方程，扣除空白值后，求出样品中各元素含量。以D=C×3δ/A求出检出限，其中D为相对检出限，单位mg/L；C为待测溶液的浓度，单位mg/L，δ为空白溶液测量的标准偏差，A为测试溶液的吸光度值。
2 结果与讨论
2.1 前处理方法
采用2 mol/L盐酸溶液处理样品，得到无悬浮物和沉浊物的无色澄清溶液，样品处理效果较好。
2.2 测定方法评价
按1.3.3同时测定各元素的吸光度值，回归方程、相关系数、检出限及线性范围，结果见表3。
该方法准确度，回收率结果见表4。
2.3 豌豆中微量元素的测定结果
测试条件（表2）将标准溶液和处理好的待测样品溶液，分别在对应的工作条件下测定吸光度。对样品重复测定3次，计算各元素的含量，豌豆中微量元素的测定结果见表5。
3 小结
Cu为人体必需微量元素，为血浆铜蓝蛋白、超氧化歧化酶，细胞色素C氧化酶等的构成要素，对造血系统、中枢神经系统的发育，对骨骼及结缔组织的形成具有重要作用[2，3]。Zn能维持机体的正常发育，可提高白细胞功能，使血小板凝集功能降低，还可促进DNA、蛋白质的合成，有促进生长发育，促进伤口愈合等各种功能[4]。Mn主要存在于垂体、肝胰脏和骨的粒线体中，为多种酶的组成部分；Mn还参与体内的造血过程，促进细胞内脂肪的氧化作用[5]。Fe是生物体内含量最丰富的微量元素之一，同时是血红蛋白的重要组成部分和血液中输送氧气和交换氧气的重要元素[3]。
豌豆是我国常用蔬菜，对其含有的微量元素的种类和含量有必要进行研究。通过分析比较可知，豌豆中有益元素Cu、Zn、Mn、Fe含量较高，特别是Zn含量达到5 907.11 mg/kg，从元素含量上看，豌豆具有药用和保健的双重功效，该结果可作为豌豆的临床应用量化依据，并可为深入研究其确切的药理作用提供一定参考。
参考文献：
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血液的化学元素范文第15篇
[关键词] 超高压液相色谱-二级质谱联用法；元胡止痛片；延胡索乙素；药物代谢动力学
[中图分类号] R927 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2017）03（a）-0036-04
UPLC-MS/MS determination and pharmacokinetic study of plasma concentration of Tetrahydropalmatine in Yuanhuzhitong Tablets
SHAN Wenjing1 XU Xinrui1 WU Jian2
1.Department of Pharmacy， the Fifth People's Hospital of Dalian City， Liaoning Province， Dalian 116021， China； 2.School of Science， Harbin University of Commerce， Heilongjiang Province， Harbin 150076， China
[Abstract] Objective To establish an UPLC-MS/MS determination method of Tetrahydropalmatine in rat plasma， explore pharmacokinetic process in rat after intragastric administration of Yuanhuzhitong Tablets. Methods The chromatography was eluted with mobile phase consisted of acetonitrile and 0.1% formic acid solution at the flow rate of 0.35 mL/min by gradient elution. Multiple-reaction monitoring scanning mode was employed for quantification with switching electrospray ion source polarity in positive mode. The pharmacokinetic parameters were calculated by using DAS 3.0 software. Results The linear ranges of Tetrahydropalmatine was 2.93-711 ng/mL. RSDs of inta-day and inter-day were all lower than 15%， and the average recovery was more than 87.6%. After intragastric administration of Yuanhuzhitong Tablets， AUC0-t of Tetrahydropalmatine was （11 359±3026） ng・min/mL， t1/2 was （342±36）min. Conclusion UPLC-MS/MS is a rapid， sensitive and specific method for the determination of Tetrahydropalmatine in rat plasma. This method is suitable for pharmacokinetic analysis of Yuanhuzhitong Tablets in rats.
[Key words] UPLC-MS/MS； Yuanhuzhitong Tables； Tetrahydropalmatine； Pharmacokinetics
元胡止痛片是比^典型的处方组成相对简单的中药复方制剂，该方剂是由延胡索（醋制）和白芷两味中药组成，具有理气、活血、止痛之功效，用于治疗气滞血瘀的胃痛、肋痛、头痛和痛经等。由于该方组方简单、疗效确切，被收载于1985年及以后各版《中国药典》。经研究发现，生物碱和香豆素类化合物是延胡索和白芷中的主要活性成分[1-3]，且具有广泛的药理活性，如血管舒张、止痛、抗炎、抗焦虑及抗痉挛等[4-9]。其中延胡索乙素是延胡索中的异喹啉类生物碱，是元胡止痛片中的重要活性成分，具有较强的镇痛、镇静、催眠等药理作用，是元胡止痛片中的有效活性成分之一。处方中所用延胡索多经过醋制，因为游离的生物碱较难溶于水，经醋制后生成醋酸盐而易溶于水而发挥疗效[10-12]。
延胡索乙素既是元胡止痛片的物质基础，又是质量控制常用的指标物[13]。已有研究建立了元胡止痛片中延胡索乙素[14]及香豆素类成分[15-20]的质量控制方法，但未见药动学研究报道。本研究首次采用超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS），研究元胡止痛片中代表性的延胡索乙素在大鼠体内的药代动力学行为，为该组方更深层次开发利用提供科学依据，为元胡止痛片的临床应用提供参考。
1 仪器、试药与方法
1.1 仪器
UPLC-MS/MS分析系统（由Agilent 1290高效液相色谱仪和Agilent 6460质谱检测器组成）；LG16-B型高速离心机（北京雷勃尔离心机有限公司）；Bandelin Sonorex RK 1208BH超声波清洗器（德国）；HWS 24型电热恒温水浴锅（上海一恒科学仪器有限公司）；Milipore超纯水机（美国Mililpore公司）；METTLER Toledo AB265-S电子天平（瑞士）。
1.2 药品
甲醇、乙腈购于美国ACS恩科化学，乙酸、乙酸铵购于Sigma公司，均为色谱纯。水为超纯水，其余试剂均为分析纯。元胡止痛片购于哈尔滨人民同泰药房，生产厂家为河南宛西制药有限公司，生产批号：160102。延胡索乙素、柚皮苷购于中国食品药品检定研究院。
1.3 实验动物
清洁级雄性SD大鼠，体重（270±30）g，月龄为4个月，哈尔滨医科大学实验动物中心，许可证号：SCXK（黑）2013-001。
1.4 方法
1.4.1 标准溶液的配制 精密称取对照品延胡索乙素适量，用甲醇溶解并定容，得延胡索乙素（1.31 mg/L）的对照品储备液。
1.4.2 标准曲线血浆样品及质控样品的制备 精密吸取“1.4.1”项中延胡索乙素标准品溶液10 μL，加入空白血浆90 μL，涡旋30 s，配制成延胡索乙素2.93～659 ng/mL标准曲线血浆样品。延胡索乙素质控样品为4.35、47.9、527 ng/mL。
1.4.3 色谱条件 采用Waters ACQULTY UPLC C18（2.1 mm×100 mm，1.7 μm）色V柱进行分析，以水（含0.1%甲酸溶液）为流动相A，乙腈为B，进行梯度洗脱。0～2 min，流动相A（%）为9580；2～3 min，流动相A（%）为8070；3～4 min，流动相A（%）为7050；4～5 min，流速为0.35 mL/min进样量为1 μL，柱温为30℃。
1.4.4 质谱条件 电喷雾离子源（ESI源），检测方式：正离子检测，扫描方式：多反应离子监测（MRM），对照品的选择检测离子质荷比为延胡索乙素：356.2192.1干燥气（N2）流速11.0 L/min，Nebulizer 0.10335 MPa，干燥气温度300℃，检测器电压4000 V。
1.4.5 血浆样品处理方法 取大鼠血浆50 μL，加入200 μL内标柚皮苷溶液（20.0 ng/mL）涡旋1 min，于4℃、15 000 r/min离心10 min，取上清液置离心管中，氮吹仪下氮气吹干，残留物用50 μL甲醇-水（50U50）溶解，于4℃、15 000 r/min离心10 min，取上清液1 μL进样。
1.4.6 药动学 实验大鼠6只，自由饮水，给药前禁食12 h，灌胃给药，给予元胡止痛片3.0 g/kg。分别于给药后0.083、0.25、0.5、1、1.5、2、4、6、8、12、24 h眼底静脉丛毛细管取血0.1 mL/只，肝素钠抗凝，4500 r/min离心10 min，分离上层血浆，-40℃保存备用。
1.4.7 数据分析 血药浓度-时间数据采用DAS 3.0药动学软件按非房室模型处理，计算药动学参数，所得数据以x±s表示。
2 结果
2.1 方法学考察
2.1.1 专属性考察 取大鼠空白血浆、空白血浆+内标溶液、空白血浆+对照品、血浆样品，按血样处理方法处理，进样，结果见图1～4，血浆的内源性物质不干扰各成分和内标的测定，表明液质行为及专属性良好。
2.1.2 标准曲线和线性范围 取大鼠空白血浆，每份90 μL，加入延胡索乙素对照品系列溶液10 μL，制得被分析物的血药浓度为延胡索乙素2.93、8.79、26.3、79.1、237、711 ng/mL；分别精密吸取各标准曲线血浆样品50 μL，按“1.4.5”项的方法处理，在“1.4.3”项条件下进样测定，记录色谱图。采用加权（1/X2）最小二乘法，以待测成分峰面积与内标峰面积的比值（Y）对样品质量浓度（X）进行曲线拟合回归，得工作方程，定量限以S/N≥10计，线性方程Y=0.0416X+0.361，R2为0.9959，线性范围为2.93～711 ng/mL，延胡索乙素在相应的范围内线性良好。
2.1.3 准确度和精密度 配制低、中、高3个质量浓度的对照品血浆样品，按“1.4.5”项下方法处理，每个质量浓度取6份样本，1 d内分别测定6份样品，并各取1份样品连续测定3 d，计算日内、日间精密度见表1。
2.1.4 回收率与基质效应 分别制备低、中、高浓度的含药QC样品，按“1.4.5”项下方法操作，进样分析，记录峰面积，每一浓度平行测定6份，记录待测物和内标的峰面积比值为A；另取空白血浆，按“1.4.5”项下方法操作处理后，加入对应的低、中、高浓度的系列对照品溶液进样分析，记录待测物和内标的峰面积比值为B，每一浓度平行测定6份；A/B×100%即得提取回收率。另用流动相将标准系列溶液配制成与上述理论浓度相同的低、中、高浓度溶液直接进样分析，每一浓度平行测定6份，记录待测物和内标的峰面积比值为C，基质效应的计算方法为B/C×100%。延胡索乙素低、中、高浓度的回收率和基质效应见表1。结果表明所建方法能够满足生物样品的测定要求。
2.1.5 样本稳定性考察 考察各成分低、中、高3个质量浓度的质控样品室温放置、自动进样器内、-40℃长期冷冻、冷冻-解冻3个循环等不同存储条件下的稳定性。结果表明，血浆样品室温放置4 h、血浆样品处理后在自动进样器内放置24 h、血浆样品冷冻-解冻循环3次、血浆样品长期冷冻于-40℃冰箱内30 d，各成分的RSD均< 15%。见表2。
2.2 药动学试验
取健康SD大鼠6只，实验前12 h禁食不禁水。按3.0 g/kg（按照元胡止痛片使用说明书每人每次用量为1.5 g，药动学研究采用其给药量20倍灌胃给药，即每人每次30 g，参照人体-大鼠给药量折算方法，得大鼠给药量为3.0 g/kg）灌胃元胡止痛片，分别于给药后5、10、15、20、30、45、60、90、120、150、180、240、360、480、720、1440 min经大鼠眼球后静脉丛采血约0.1 mL，置肝素化试管中，4500 r/min离心10 min，分取上清，血浆置于-40℃冰箱中保存待测。样品按“1.4.5”项下方法处理，取上清进行UPLC-MS/MS测定。延胡索乙素在大鼠体内的血药浓度数据采用DAS 3.0软件进行计算，t1/2为（342±36）min，达峰浓度（Cmax）为（49.3±1.25）ng/mL，达峰时间（Tmax）为180 min和药-时曲线下面积（AUC0-t）为（10 246±2735）ng・min/mL，平均驻留时间（MRT0-t）为（482±38）min。见图5。
3 讨论
中药药代动力学是借助于药代动力学的基本理论研究中草药活性成分、组分、中药单方和复方体内吸收、分布、代谢和排泄的动态变化规律及其体内时量-时效关系。中药药代动力学虽起步较晚，但新理论、新方法的涌现以及HPLC、LC-MS和LC-NMR等检测手段的出现，为认识中药体内过程中所产生的药物信息提供了有力技术支撑。中药药代动力学为研究中药各化学成分的体内代谢过程和各组分间在体内的相互作用提供了新途径，但由于中药复方中的化学成分相对复杂且微量，如何从整体上阐明中药的药效物质基础是目前所面临的问题之一。延胡素作为君药，是元胡止痛片中的重要组成部分，其化W成分是发挥药理作用的物质基础。本文通过分析这种有效成分在体内的药代动力学过程，为阐明元胡止痛片的药理作用提供参考。本文采用UPLC-MS/MS及内标法对延胡索乙素进行定量测定，保证了血药浓度结果的准确性。UPLC-MS/MS检测一个样品所需时间短，且所需的血浆样本量少，非常适合药代动力学等研究中的大批量样品研究。
在样品处理过程中，分别考察了甲醇沉淀蛋白法、乙腈沉淀蛋白法、乙酸乙酯萃取法，对各自所得回收率进行分析，结果显示，甲醇沉淀蛋白法提取回收率最高且处理方法较为简单。根据UPLC-MS/MS的分析结果，发现元胡止痛片灌胃给药后，延胡索乙素能迅速吸收入血发挥作用。
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