双参片中人参皂苷Rb1Rg1Re含量测定范文

【摘要】目的：建立双参片中人参皂苷Rb1、Rg1、Re的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法测定人参皂苷Rb1、Re和Rg1的含量。结果：人参皂苷Rb1对照品进样量在2.408～24.08μg范围内呈良好的线性关系，回归方程为Y=299.82X-26.243(r=0.9995)，人参皂苷Rg1、Re对照品进样量分别在0.600～2.400μg、5.000～20.000μg范围内呈良好的线性关系，回归方程分别为Y=270.6X-9.5751(r=0.9999)和Y=241657X+15.104(r=0.9999),平均回收率分别为97.41%、97.67%、96.10%,RSD分别为1.92%、2.14%、1.26%(n=5)。结论：本法测定双参片中人参皂苷Rb1、Rg1、Re的含量测定方法简便，灵敏，准确，专属性强，能够有效控制双参片的内在质量。

【关键词】色谱法高压液相人参分离和提取双参片

双参片由西洋参、桃仁、麦冬等11味中药组成，具有益气活血，舒心通脉的功效，主要用于气虚血瘀所致的胸痹。为了更好的控制本品的质量，依照中国药典及双参片的处方组成，建立双参片中西洋参药材中人参皂苷Rb1、Rg1、Re的含量测定方法，有效的控制双参片的内在质量，为双参片大批量投入市场提供质量保证。

1实验材料

人参皂苷Rb1、Rg1、Re(由中国药品生物制品检定所提供，批号分别为：110704200420、10703200424、0736200117,规格：供含量测定)。乙腈为色谱纯，水为双蒸水，所用其它试剂均为分析纯。双参片为本实验室制备。Agilent1100型高效液相色谱仪；BP211D型十万分之一电子分析天平(德国赛多利斯公司)；RQ3200型超声清洗机(江苏进荣超声波有限公司)。

2实验方法

2.1色谱条件ODSC18色谱柱(250mm×4.6mm)；以乙腈水(30：70)为流动相测定人参皂苷Rb1；以乙腈水(19.2：80.8)为流动相测定人参皂苷Rg1、人参皂苷Re；检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷Rb1峰计算应不低于5000［1］。

2.2对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Rb1适量，加甲醇制成每毫升含人参皂苷Rb11.0mg的溶液；人参皂苷Rg1、人参皂苷Re对照品适量，加甲醇制成每毫升各含0.1mg、1.0mg的混合溶液，摇匀，即得。

2.3供试样品溶液的制备取本品50片，除去薄膜衣，研细，取10g，精密称定，置索氏提取器中，加三氯甲烷80mL，加热回流1h，放冷，滤过，弃去氯仿液，药渣挥去氯仿，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇50mL，称定重量，加热回流1h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，放冷，滤过，精密量取续滤液50mL，置蒸发皿中，蒸干。残渣加水20mL使之溶解，转移至分液漏斗中，用水饱和正丁醇振摇提取5次，每次20mL，合并正丁醇液，用1%氢氧化钠溶液提取3次，每次20mL，将正丁醇液蒸干，残渣用甲醇溶解，转移至10mL量瓶中，并加甲醇稀释至刻度，摇匀，微孔滤膜滤过，即得［3］。

2.4阴性对照样品溶液的制备取不含西洋参的处方，按制备工艺制成缺西洋参的阴性对照品，再按供试品溶液的制备方法制成阴性对照品溶液。

2.5线性关系考察人参皂苷Rb1线性范围为2.408～24.08μg，回归方程Y＝299.82X-26.243（r＝0.9995），人参皂苷Rg1和人参皂苷Re线性范围分别为0.600～2.400μg、5.000～20.000μg，回归方程人参皂苷Rg1Y＝270.6X-9.5751（r＝0.9999），人参皂苷ReY＝241.57X+15.104（r＝0.9999）。

2.6精密度试验分别精密吸取人参皂苷Rb1溶液，人参皂苷Rg1、人参皂苷Re对照品混合溶液，分别注入液相色谱仪，RSD分别为0.50％、1.86％、3.59％(n=5)，表明仪器的精密度良好。

2.7稳定性试验分别精密吸取人参皂苷Rb1溶液，人参皂苷Rg1、人参皂苷Re对照品混合溶液，相隔一定时间，分别注入液相色谱仪，结果人参皂苷Rb1RSD为3.00(n=5)，表明在36h内测定结果稳定；人参皂苷Rg1、人参皂苷Re对照品混合溶液RSD分别为3.51％、2.77%，表明在48h内测定结果稳定。

2.8重现性试验精密称取同一批样品共5份，按供试品溶液项下制备，依法独立测定,计算样品中人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re含量，结果RSD分别为1.50%、2.55%、2.66%，表明该方法重现性良好。

2.9加样回收率试验精密称取已知含量样品共5份(人参皂苷Rb14.5302mg/g，人参皂苷Rg10.2460mg/g、人参皂苷Re2.5879mg/g)，分别精密加入对照品适量，依法测定，结果人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的平均回收率分别为97.41%、97.67%、96.10%，RSD分别为1.92%、2.14%、1.26%，表明本法准确性较好，方法可行。

2.10样品的测定取3批样品，依法制备供试品溶液，分别精密吸取人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Re对照品溶液及供试品溶液，注入液相色谱仪，测定峰面积，计算含量。结果3批样品中每片含有人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re含量总和分别为1.8714mg/片、1.7963mg/片、2.2325mg/片，平均含量为1.9667mg/片。

3

;讨论

本试品研究更有效地控制了产品的内在质量变化，通过对3批样品含量测定的实际结果及药品贮存、运输等影响因素的考虑，暂定本品含西洋参以人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的总量计，每片不得少于1.57mg。

西洋参中人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量测定曾选用乙腈水(31:69)，乙腈0.1%磷酸溶液(19.5:80.5)为流动相，还根据中国药典一部2005年版西洋参药材含量测定项下梯度洗脱方法考察［1］，分离效果均不理想，经多次试验确定乙腈水(30:70)为流动相测定人参皂苷Rb1的含量，采用乙腈水(19.2:80.8)为流动相测定人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量，分离度均大于1.50，理论板数均大于5000，阴性无干扰。

【参考文献】

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典［M］.北京:化学工业出版社,2005:8788.

［2］王宝琴.中成药质量标准与标准物质研究［M］.北京:中国医药科技出版社,1994:493497.

［3］陈发奎.常用中草药有效成分含量测定［M］.北京：人民卫生出版社,1997:97101.新晨