丹七片中丹参素HPLC测定范文

【摘要】目的用HPLC法测定丹七片中丹参素的含量。方法HPLC用外标一点法，DiamonsilODS1C18柱，甲醇-水－冰乙酸（8：91：1）为流动相，流速为1.0ml/min，λ=281nm。结果丹参素在0.0747～0.224mg/ml范围内呈良好线性,回归方程为Y=7033980.19X-34659.73，r=0.9999，平均加样回收率99.4%，RSD为1.5%（n=6）。结论方法简便，准确，专属性强，测定结果重复性好，为丹七片中丹参素的定量分析提供了科学有效的方法。

【关键词】丹七片丹参素HPLC

【Abstract】ObjectiveToestablishthemethodfordeteminingthecontentofDanshensuinDanqiPianbyHPLC.MethodsUsingDiamonsilODS1C18Column,Methylalcohol-wate-Aceticacidglacial（8：91：1）asthemobilephase,detectionwavelengthas281nmandflowratewas1.0ml/min.ResultsThecalibrationcurvewaslinearatarangeof0.0747mg/ml～0.224mg/mlfortheDanshensuandlinearequationwasY=7033980.19X-34659.73，r=0.9999.Theaveragerecoverywas99.4%andtherelatedstandarddeviation（RSD）was1.5%（n=6）.ConclusionThismethodwassimpleandaccurateandproper,whichcanbeprovideforscientificquantitativeanalysismethodofDanshensuinDanqiPianandthereduplicationoftheresultwasgood.

【Keywords】DanqiPian；Danshensu；HPLC

丹七片收载于部颁药品标准中药成方制剂第一册中，功能主治：活血化瘀。用于血瘀气滞，心胸痹痛，眩晕头痛，经期腹痛［1］。处方由丹参、三七组成，原标准中只有鉴别查项，没有含量控制项。为了更好地控制丹七片的质量，提高丹七片的质量标准，笔者对丹七片处方进行了分析，处方中主药丹参是用水提取的，参考《中国药典》2005年版一部复方丹参滴丸质量标准［2］，进行本品中丹参素含量测定，并进行了方法学研究，控制药品质量。采用高效液相色谱法测定丹参素含量，方法简便快速，稳定可靠，专属性强。

1仪器与试药

1.1仪器高效液相谱仪：SPD—10A日本岛津；紫外分光仪：上海康化生化仪器制造厂；超声波清洗器：SK3200H上海科导超声仪器有限公司。

1.2试药丹参素钠对照品（批号110805-200508，供含量测定用）由中国生物制品检定所提供；丹七片（批号：20070401、20070402、20070403）由河南百年康鑫药业有限公司提供；其他试剂均为分析纯。

2方法与结果

2.1色谱条件［2］以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水－冰乙酸（8：91：1）为流动相；检测波长为281nm。理论板数按丹参素峰计算应不低于2000。

2.2溶液的制备

2.2.1对照品溶液的制备取丹参素钠对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.16mg的溶液（相当于每1ml含丹参素0.144mg），即得。色谱图见图1。

2.2.2供试品溶液的制备取本品20片，研细，取1.0g，精密称定，置25ml量瓶中，加甲醇20ml，超声处理30min使溶解，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，取上清液，滤过，即得。色谱图见图2。

2.2.3阴性样品的测试取缺丹参的样品，按供试品制备法制备阴性样品后测定，在丹参素相应位置无峰出现，说明阴性样品的其他成分无干扰。色谱图见图3。图1丹参素对照品色谱图图2丹七片色谱图图3阴性样品色谱图2.3线性关系的考察精密称丹参素钠对照品适量，用甲醇稀释制成不同浓度的对照品溶液，浓度分别为0.0747mg/ml、0.1128mg/ml、0.1494mg/ml、0.1868mg/ml、0.2241mg/ml，照上述色谱条件各进样10μl测定峰面积，以峰面积积分值为纵坐标，丹参素的浓度为横坐标绘制标准曲线，计算回归方程Y=7033980.19X-34659.73，r=0.9999（n=5）,表明丹参素在0.0747～0.2241mg/ml之间呈良好的线性关系。

2.4精密度试验取本品20片（批号：20070402），研细，称取1.0g，精密称定，按供试品溶液制备方法制备供试品溶液，吸取10μl，连续进样6次，测定峰面积，测定结果RSD为2.17%，表明精密度良好。

2.5重现性试验取本品20片（批号：20070402），称取总重后研细，分别称取6份，每份1.0g，精密称定，然后按供试品溶液制备方法制备供试品溶液。按照正文含量测定方法，连续测定6次含量，测定每份样品中丹参素的含量，结果RSD为0.62%，重现性良好。

2.6稳定性试验取本品20片（批号：20070402），研细，称取1.0g，精密称定，按供试品溶液制备方法制备供试品溶液，分别在0、2、4、6、8h测定峰面积，RSD为1.38%（n=5）。表明制备的供试品溶液在8h内稳定。

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bsp;2.7加样回收率试验取本品20片（批号：20070402），称取总重后研细，分别称取6份，每份0.5g，精密称定。分别置之25ml量瓶中，精密加入用1.0764mg/ml的丹参素对照品溶液2ml，按照供试品溶液制备方法，制备供试品溶液，进样量10μl，测定丹参素含量，平均回收率为99.4%，RSD为1.5%（n=6）。见表1。表1加样回收率试验

2.8样品测定按照供试品溶液制备方法对3批中试产品进行测定，测定结果见表2。表2样品测定结果

3讨论

根据3批测定结果，每片含丹参以丹参素（C9H10O5）计，均不少于1.0mg,由于各地丹参药材的差别较大，因此暂规定：本品每片含丹参以丹参素（C9H10O5）计，均不少于0.8mg。供试品溶液制备方法的考察。为了考察拟定供试品溶液制备方法的合理性，分别取3份样品，精密称定，置25ml量瓶中，加甲醇20ml，超声处理15、30、45min使溶解，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，取上清液，滤过，即得。按照色谱条件进含量测定，实验结果表明，超声处理30min已将供试品中丹参素提取完全，故采用超声处理30min。

【参考文献】

1国家药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂.北京：卫生部药典委员会，1989，48.

2国家药典委员会.中国药典，2005年版一部.北京：化学工业出版社，2005，528.新晨