口含片质量标准方法与与验证范文

【论文关键词】：TTB口含片因体分散法反相高效液相色谱法溶出度质量标准检测

【论文摘要】：本文主要建立TTB口含片质量标准的分析方法及验证。分析项目包括：鉴别试验、限度检查、含量及其它成份测定，溶出度检查。实验方法：分别采用紫外分光光度法、高效液相法和显色法鉴定，采用转篮法测定溶出度，采用HPLC法测定含量。本文所确立的方法TTB口含片质量控制。

TTB(cifixime)又名世福素，是第一个上市的第三代口服头孢菌素，再其C7位上结合有苯甘氨酸类的基团，从而具备可口服吸收的结构，它具有抗菌谱广、抗菌作用强、有效浓度持续时间长等优点，在治疗各类感染中有较高的疗效。该药物1987年由日本藤泽(fujisawa)公司开发，现已在全球二十多个国家上市，该药品被子列为我国“十五”推荐研究开发的重要头孢菌素品种及部级化学医药新产品指南[12]

据最近报道，2002年美国氰胺公司和日本藤泽公司的TTB销售额超过1.8亿美元。我国1994年由广州白云山制药总厂在中国独家生产TTB并经多家医院的临床验证，治疗效果达到日本同类产品效果，现已在国内逐步推广使用，由于价格较贵，目前市场上占有率并不高。但口服头孢菌素由于服用方便且经济实惠，因而深受医务人员和患者的欢迎。我国目前口服第三代头孢菌素品种较少，TTB作为一代优秀的头孢菌素类新品种，具有很好的前景[1]

目前我国头孢菌素生产业尚属于发展阶段，开发TTB新剂型、新工艺不仅有利于产品质量调整，而且可以增加竞争力，再不断开发国内市场的同时，以优质低价的产品参与国际竞争。

一、仪器与试剂

仪器：高效液相色谱仪（Agilent1100series）,智能药物溶出仪（RCZ-8A，天津大学精密仪器厂），754型紫外分光光度计（上海第三分析仪器厂），SC69-02C水分快速测定仪（上海恒平科学仪器有限公司），紫外扫描仪（Shimadzu岛津UV-260），电子天平ARZ140Adventurer(OHAUSCORP.FlorhamNJUSA),微量进样器50μl（上海高鸽工贸有限公司），精密PH计（PHS-3C上海雷磁仪器厂）

试剂：磷酸（85%武汉市化学试剂厂），盐酸（分析纯，信阳市化学试剂厂）10%四丁基氢氧化铵（分析纯中国医药（集团）上海化学试剂公司），甲醇（康科德，天津市康科德科技有限公司），纯净水（ICEDEW冰露武汉可口可乐饮料有限公司），氢氧化钠（分析纯天津市化学仪器供应站），磷酸二氢甲（分析纯天津市北方化玻购销中心），Methanol(HPLCgradeFisherChemalert),Acetonitrile(HPLCgradeBurdick&Jackson),TTB(购自广州白云山制药有限公司，批号kw060801）

二、方法与内容

1.性状

本品原料的性状是淡黄色，辅料为白色，制成制剂后为浅黄色片。

2.鉴别

2.1.紫外分光光度法

参照卫生部部标准（试行）WS-691（X-505）-2002：将片剂研磨成细粉，取适量加磷酸盐缓冲液（PH7.0）制成每1ml约含TTB10μg的溶液，滤过，取续滤液，照分光光度法（中国药典2005年版二部附录IVA）测定，在288nm的波长处有最大吸收。

2.2显色法

参照卫生总部标准（试行）：将片剂研磨成细粉，取适量加1%碳酸氢钠溶液2ml，振摇数分钟，滤过，取渡液加稀盐酸1ml置冰浴中冷却，加新鲜配置的亚硝酸钠溶液（1→100）ml,放置2min加氨磺酸铵溶液（1→40）ml,摇匀，放置1分钟，再加盐酸N-（1-萘）乙二胺溶液（1→1000）ml,摇匀，溶液呈紫红色，共检查三批样品，均呈正结果。

3.溶出度方法的试验

参照卫生部部标准（试行）WS-691（X-505）-2002制定TTB口含片的溶出度的检测方法。

3.1溶剂的选择

分别采用磷酸盐缓冲液（PH6.5)(参考部标WS-691（X-505）-2002）盐酸溶液（参考中国药典）和水各1000ml为溶剂，转速为每分钟100转，经30分钟时取样滤过，精密量取续滤液5ml，用上述溶剂稀释成25ml，另取原料，用上述溶剂配制成10μg/ml的溶液，照分光光度法，在288nm处分别测定吸光度，计算每片的溶出量，结果见表2。

3.2转速的确定

其它条件不改变，将转速在75转/分，100转/分，120转/分，分别测定溶出度，结果见表3。

3.3溶出曲线的绘制

以磷酸盐缓冲液（PH6.5）1000ml为溶剂，转速100转/分，分别取六片，投入到6个容器中，分别于10、25、35、45、60、75、90分钟取样15ml滤液，滤过，照紫外分光光度法测定，结果见表4-1，图4-2。

3.4片剂辅料的影响

将每片中所含辅料分别投入到容器中，照溶出度方法项下操作，分别在10、20、30、45分钟取样，用紫外分光光度法测定结果，见下表5。说明辅料对主药的测定无干扰。

3.5溶出度实验结果

将TTB口含片分别按照制定的溶出度检验方法进行检查，均符合规定。

4含量测定（HPLC法）

参照卫生部标准（试行）WS-691（X-505）-2002，将TTB口含片的含量测定采用HPLC法（中国药典2005年版二部附录VD）测定。

4.1色谱条件与系统适用性实验

仪器：Agilent1100seriesG1310IsoPumPG1314AVWD;色谱柱：ReliaSilC18-（5um250*4.6mm）;流动相：四丁基氢氧化铵溶液（用1.5mol/l磷酸溶液调节PH值到7.0）-乙腈（70：30）

检测波长为254nm，TTB峰保留时间为11.045min，分离度为1.892，理论塔板数13446，均符合部颁标准要求。

4.2辅料的影响

按处方量取空白辅料，置100ml容量瓶中，加磷酸盐缓冲液（PH7.0）并稀释至刻度，摇匀，取0.020ml注入液相色谱仪，观察实验结果得知辅料对主药吸收无干扰。

4.3回收实验

精密取TTB原料9份（40mg、50mg、60mg各3份），按处方规定加空白辅料，配成供试品溶液，另取同批TTB原料适量，配成对照溶液，分别取0.020ml注入液相色谱仪，记录色谱图，用外标法计算回收率，见表7。

4.4线性实验

精密称取20mgTTB原料药，分别用磷酸盐缓冲液（PH7.0）配成不同浓度的供试品溶液，分别取0.020ml注入液相色谱仪，记录色谱图。

4.5方法的精密度

取TTB原料20mg，置100ml容量瓶中，按处方规定加入空白辅料，配成供试品溶液；另取同批TTB原料适量配成0.120mg/ml的对照液，分别取0.020ml，连续进样6针，结果见表9。

4.6稳定性实验

取本品细粉，加磷酸盐缓冲液（PH7.0）使溶液并定时稀释成0.020g/ml，于0、1、2、4、6小时分别注入液相色谱仪，见表10，记录峰面积，计算RSD值。

4.7HPLC法测定含量

供试品溶液的制备与测定：取本品10片，精密称定，研细，精密称取TTB适量（约相当于TTB200mg）置100ml量瓶中，加磷酸盐溶液缓冲液（PH7.0）60ml，振摇使TTB溶解（必要时超声处理使溶解完全），再加磷酸盐缓冲液（PH7.0）稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置100ml容量瓶中加磷酸盐缓冲液（PH7.0）稀释至刻度，摇匀，取0.020ml注入液相色谱仪；记录色谱图。

对照品溶液的制备与测定：精密称定TTB原料药20mg，置100ml容量瓶中，加磷酸盐缓冲液（PH7.0）稀释成每毫升中约含TTB0.020mg的溶液（必要时超声处理使溶解完全），同上测定。

含量测定方法：按外标法以峰面积计算出供试品中TTB的含量。

【参考文献】：

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2.张永信.头孢菌素的药理特点和选用.上海医药.2003;24(11)495-497

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4.谢铂.中国医院药学杂志.1998.18(3);250

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9.杨威,戴得银,头孢克肟药学情报通讯.1994;12(2)

10.陈新谦,金有豫,主编,新编药物学,第十四版,北京,人民卫生出版社,1995;59-60

11.紫外分光光度法测定头孢克肟胶囊的含量,广西医学,2002;24(9);1409-1410